第 40 讲 微生物的利用[考纲要求] 1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。考点一 微生物的分离与培养[重要程度：★★☆☆☆]1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。(2)营养构成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。(3)种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。2．无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。(2)关键：防止外来杂菌的入侵。(3)不同对象的无菌操作方法[连线]3．大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基→→→→(2)纯化大肠杆菌的方法① 纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。② 纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。③ 常用的微生物接种方法有两种a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。b．稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。(3)菌种的保存方法① 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。② 对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。1．消毒和灭菌的不同点比较项目理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能2.两种纯化细菌方法优缺点的比较项目优点缺点平板划线法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数稀释涂布平板法可以计数，可以观察菌落特征吸收量较小，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延3. 稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低，为什么？答案 这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。4．平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同：(1)第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。(2)每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。(3)划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。易错警示 配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项(1)倒平板的适宜温度是 50 ℃左右，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。(2)平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖...
