第 42 讲 生物技术在其他方面的应用[考纲要求] 1.植物的组织培养。2.PCR 技术的基本操作和应用。3.蛋白质的提取和分离。4.实验：DNA 的粗提取与鉴定。考点一 植物组织培养技术[重要程度：★★★☆☆] 1．组织培养过程2．培养基(1)成分：大量元素、微量元素、有机物、植物激素和琼脂。(2)类型：MS 培养基 、发芽培养基和生根培养基。(3)作用：植物组织或器官生长和发育的营养条件。(4)配制：称量、溶解、调 pH 、分装(三角瓶)、灭菌。3．菊花的组织培养(1)制备 MS 固体 培养基(2)外植体消毒(3)接种：始终在酒精灯旁进行，对接种工具要用火焰灼烧灭菌。将菊花茎段插入培养基中时注意不要倒插。(4)培养与移栽：在 18～22 ℃的无菌箱中培养，得到试管苗后进行移栽。4．月季的花药培养(1)被子植物的花粉发育过程花粉母细胞→小孢子四分体时期→单核期→双核期→花粉粒。(2)产生花粉植株的两种途径(3)影响花药培养的因素① 主要因素：材料的选择和培养基的组成。② 其他因素：亲本植株的生长条件、材料的低温预处理及接种密度等。(4)实验操作① 材料的选取：月季花药培养一般选择单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期。确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法。某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青—铬矾法，这种方法能将细胞核染成蓝黑色。② 接种：消毒后的花蕾，在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。剥离花药时尽量不要损伤花药。③ 培养 ：温度控制在 25_℃左右，幼小植株形成后才需要光照。如果花药开裂释放出胚状体，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开。1．植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同点 项目内容 菊花的组织培养月季的花药培养理论依据植物细胞的全能性基础过程脱分化→再分化外植体的细胞类型体细胞生殖细胞操作流程制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培选材→消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育影响因素选材、营养、植物激素、pH、温度、阳光等培养结果正常植株单倍体植株生殖方式无性生殖有性生殖可育性可育高度不育，秋水仙素处理后可育2. 探究植物激素对实验结果的影响(1)生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点如下：① 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。② 使用顺序不同，结果不同，具体如下：使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞...
