学案 61 DNA 和蛋白质技术考纲要求1
蛋白质的提取和分离 实验与探究2
PCR 技术的基本操作和应用 实验与探究复习要求1
根据蛋白质分子的特点,选择不同的方法提取和分离2
PCR 技术的原理和条件3
PCR 技术的基本操作基础自查一、血红蛋白的提取和分离1.凝胶色谱法:
2.电泳(1)概念:
(2)特点:
3.实验操作(1)样品处理:
(2)粗分离:
(3)纯化:
(4)纯度鉴定:
二、PCR 技术扩增 DNA 片段1.PCR 技术(1)PCR: 的简称,是一种 的技术
(2)扩增方向:
(3)引物特点: ,能 ,用于 PCR 的引物长度通常为 20~30 个脱氧核苷酸
(4)原理:
(5)条件:
2.过程(1)变性:
(2)复性:
(3)延伸:
课堂深化探究一.多聚酶链式反应扩增 DNA 片段1.细胞内 DNA 复制与体外 DNA 扩增(PCR 技术)的比较细胞内 DNA 复制PCR不同点解旋酶 1引物 能量 温度子链合成相同点 2
PCR 反应的过程及结果(1)PCR 反应过程:① 变性: ② 复性:③ 延伸:(2)结果:特别提醒 DNA 复制需要引物的原因:DNA 聚合酶不能从 5′端开始合成 DNA,而只能从3′端延伸 DNA 链
二、血红蛋白的提取和分离 1.方法及原理方 法原 理凝胶色谱法 电泳法 2
实验操作程序(1)样品处理 (2)粗分离 2④ 图示:⑤ 注意:透析时间为 12 h
透析袋是用硝酸纤维素制成,小分子可自由进出,而大分子保留在袋内
(3)纯化:一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化
(4)纯度鉴定:一般用 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,来测定蛋白质的分子量,即对血红蛋白进行纯度鉴定
3.结果分析与评价项 目分 析血液样品的处理分层明显→ →凝胶色谱柱的装填 血红蛋白的分离特别提醒 ①用凝胶