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蛙类斯氏离体心脏灌流

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姓名 *** 系年级 ********* 学号*********** 科目 动物生理学实验 同组者 *** 、 *** 日期 *********** 蛙类斯氏离体心脏灌流【实验目的】1. 学习斯氏离体蛙心灌流法;2. 了解心肌的生理特性;3. 观察 Na+、K+、Ca2+离子等对离体心脏活动的影响。【实验原理】心肌具有自动节律性(autorhythmicity)收缩的特性,可以用人工灌流的方法,讨论心脏活动的规律及特点;还可以观察灌流液成分的改变对离体心脏活动的影响。【实验材料】1. 材料:蟾蜍。2. 器具:常用手术器械,解剖盘,蛙板(木质),毁髓针,玻璃分针,手术剪,手术镊,铁钉,蛙心套管,套管夹,双凹夹,滑轮,蛙心夹,支架,双针形露丝刺激电极,滴管,小烧杯,棉线,张力传感器,生理信号采集系统。3. 试剂:任氏液,5%NaCl 溶液,1%KCl 溶液,2%CaCl2溶液。【实验步骤】1. 暴露动物心脏取一只蟾蜍,双毁髓后背位置于蛙板上,一手持手术镊提起胸骨后方的皮肤,另一只手持手术剪剪开一个小口,然后将剪刀由开口处伸向皮下,向左、右两侧下颌角方向剪开皮肤。将皮肤掀向头端,再用手术镊提起胸骨后方的腹肌,在腹肌上剪一口,将金冠剪紧贴体壁向前伸入(勿伤及心脏和血管),并沿皮肤切口方向剪开体壁,剪断左右乌喙骨和锁骨,使创口呈一倒三角形。一手持眼科镊,提起心包膜,另一手用眼科剪剪快乐包膜,暴露心脏。2. 斯氏蛙心插管认真识别心脏周围的大血管。在左主动脉下方穿一线,并打一活结备用。左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉壁上剪一斜口。选择大小适宜的蛙心套管,然后将成盛有少量(套管内 2~3cm高度)任氏液(内含葡萄糖)的斯氏蛙心套管,由开口处插入动脉圆锥。当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推动,经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管口)。此时可见血液冲入套管,并使液面随心脏搏动而上下移动,表明操作成功(否则需退回并重新插入)。用滴管吸取套管中的血液,更换新奇任氏液。稳定住套管后,轻轻提起备用线,将左、右主动脉连同插入的套管用双线紧紧扎紧(不得漏夜),再将结线固定在套管的小玻璃钩上,然后剪断结扎线上方的血管。轻轻提起套管和心脏,看清静脉窦的位置,于静脉窦下方剪断有牵连的组织,仅保留静脉窦与心脏的联系,使心脏离体。(切勿损伤静脉窦)。用任氏液反复冲洗心室内余...

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