基因工程的基本操作程序（二）一．教学目标1 知识目标⑴ 简述基础理论研究和技术进步催化了基因工程⑵ 简述基因工程的原理和基本步骤2 能力目标⑴ 学会运用概念图总结基因工程的基本步骤及方法⑵ 尝试运用基因工程原理，提出解决某一实际问题的方案3 情感态度与价值观⑴ 关注基因工程的发展⑵ 认同基因工程的应用促进生产力的提高二．教学重点与难点教学重点 基因工程基本操作程序的步骤教学难点⑴ 从基因文库中获取目的基因⑵ 利用 PCR 技术扩增目的基因三．教学过程 将目的基因导入受体细胞 教学环节 1） 引出转化的概念，并强调转化的最终目的是目的基因在受体细胞维持稳定和表达2） 讲授：将目的基因导入植物细胞有三种方法，其中最常用的是农杆菌转化法3） 引导学生看书，质疑：农杆菌有何特点 教师行为 4） 引导学生看插图，概述农杆菌转化法的过程5） 质疑：将目的基因导入动物细胞中的常用方法及常用的受体细胞 看书并回答：1 农杆菌生活在土壤中，自然条件下能感染双子叶植物和裸子植物2 农杆菌中 Ti 质粒上的 T-DNA 可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体DNA 上 学生活动讨论并回答：将目的基因导入 Ti 质粒→转入农杆菌→含重组 Ti 质粒的农杆菌→导入植物细胞→植物组织培养→将目的基因导入受体细胞6） 质疑：培育转基因动物时，受体细胞能否采用动物体细胞，为何采用受精卵7） 引出原核生物的特点，早期基因工程都用原核生物作受体细胞，质疑：目的基因导入微生物细胞采用的方法8） 讲授：怎样筛选含外源基因的受体细胞，主要是应用标记基因的插入失活特性，向学生展示图，并配以习题转基因植物看书并回答：显微注射法，受体细胞是受精卵 思考并回答：动物体细胞没有全能性，受精卵全能性高，并且营养物质丰富 看书并回答：用 Ca2+处理制备感受态细胞 听讲并根据习题理解 目的基因的检测与鉴定 1） 质疑：用什么方法可以知道抗虫棉赋予了植物抗虫特性 2） 质疑：检测与鉴定有何不同，基因工程成功的标志（提示学生应用真核生物中心法则思考）3） 引出检测分为 DNA、mRNA 和蛋白质水平。强调检测转基因生物染色体的 DNA 上是否插入目的基因是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。4） 指导学生看书，质疑：DNA 水平上的检测应用什么方法，探针是什么，如何标记，检测如何操作5） 根据学生回答，补充探针还可以用地高辛和生物素标记。质疑：DNA 分子杂交原理6）...
