第十二章蛋白质的生物合成VIP专享

第十二章蛋白质的生物合成 103fold. 表 1 大肠杆菌 DNA 聚合酶特征  DNA 聚合酶 DNA 聚合酶 DNA 聚合 Ⅰ Ⅱ 酶Ⅲ 109KD 400 + 120KD 17-100 + 30 低 不详 ＞600KD 10-20 + 30,000 高 复制 分子量 每个细胞中的分子数 5′→3′聚合活性 37℃转化率核苷酸数／酶 600 分子·分钟 5′→3′外切活性 3′→5′外切活性 切刻平移活性 对 dNTP 亲和力 + + + 低 修复 功能 去除引物 填补空缺 2.2 真核生物 DNA 聚合酶(DNA polymerases in prokaryotic) 真核生物 DNA 聚合酶有 α、β、γ、δ 及 ε。它们的基本特性相像于大肠杆菌 DNA 聚合酶，其主要活性是催化 dNTP 的 5′→3′聚合活性，基本特征见表 2。 表 2 真核生物 DNA 聚合酶 亚基数 4 α 4 36-38 核 ＋ － β 4 160-300 线粒体 ＋ － 复制 γ 2 170 核 ＋ － 复制 δ 5 256 核 ＋ － 复制 ε 分子量〔KD) ＞250 细胞内定位 核 5′→3′聚合活性 ＋ 3′→5′外切活性 － 功能 复制、引发 修复 真核细胞在 DNA 复制中起主要作用的是 DNA polα，主要负责染色体 DNA 的复制。DNA polβ 的模板特异性是具有缺口的 DNA 分子，被认为它与 DNA 修复有关。DNA polγ 在线粒体 DNA 的复制中起作用。DNA polδ 不但有 5′→3′聚合活性，而且还具有 3′→5′外切酶活性，据认为真核生物 DNA 复制是在 DNA polα 和 DNA polδ 协同作用下进行的，前导链的合成靠 DNA polδ 催化。而随从链的合成靠 DNA polα 和引发酶协作作用完成。 2.3 DNA 复制起始引发体的形成及所参加的酶和蛋白质： 2.3.1.解链酶(helicase) DNA 开头复制时首先在起始点处解开双链，反应是在一种解链酶(helicase)的催化下进行的。解链酶需要 ATP 分解供应能量。大肠杆菌中 DnaB蛋白就有介链酶活性，与随从链的模板 DNA 结合，沿 5′→3′方向移动，还有一种叫做 Rep 蛋白和前导链的模板 DNA 结合沿 3′→5′方向移动。解链酶的作用就是打开 DNA 双链之间的氢键。 2.3.2 单链结合蛋白：(single strand binding proteins, SSBP) 它与解开的单链 DNA 结合，使其稳定不会再度螺旋化并且避开核酸内切酶对单链 DNA 的水解，保证了单链 DNA 做为模板时的伸展状态，SSBP 可以重复利用。 2.3.3 引发体的形成： Primer is a short sequence...