霉菌与酵母菌检测１ 设备与材料除微生物实验室常规灭菌及培育设备外,其她设备与材料如下:1。1 冰箱:2℃～5℃。1。２ 恒温培育箱:28℃±1℃。1.３ 均质器。1、4 恒温振荡器、１.５ 显微镜:１０×～１０0×。1。６ 电子天平:感量0.1g。1。7 无菌锥形瓶:容量5０0ｍｌ、２５0ml。1.８ 无菌广口瓶:５00mｌ。1、９ 无菌吸管:1ml(具0.０1ml刻度)、10ml(具0。1ml刻度)。1。10 无菌平皿:直径9０mm。1、1１ 无菌试管:10mm×７5ｍm。1。12 无菌牛皮纸袋、塑料袋。２ 培育基与试剂2.1 马铃薯-葡萄糖－琼脂培育基:见附录 A 中 A。１、2、2 孟加拉红培育基:见附录 A 中 A。２。3 操作方法3。1 试验前准备3。１。1 将供试品及所有已灭菌得平皿、锥形瓶、匀浆杯、试管、量筒、吸管(1ml、10 ｍｌ)、稀释剂等移至操作室内。准备好足够用量,避开操作中出入操作间。3。1。2 开启无菌室紫外杀菌灯与干净工作台得空气过滤装置 30 ｍ i ｎ。3.１.3 操作人员用肥皂洗手,关闭紫外杀菌灯,进入缓冲间,换工作鞋,用消毒液洗手或用乙醇棉球擦手,穿戴好无菌衣、帽、口罩、手套等。 ３。1。４ 操作前先用乙醇棉球擦手、工作台面,再用乙醇棉球擦拭供试品瓶、盒、袋等得开口处周围,待干后用灭菌剪刀或镊子将供试品启封、 3、2 样品稀释液得制备根据供试品得理化特性与生物学特性,实行适宜得方法制备样品稀释液。样品稀释液制备若需用水浴加温时,温度不应超过 45℃。样品稀释液从制备至加入检验用培育基,不得超过 1 小时。3.２.１ 固体与半固体样品称取２５g样品至盛有２2５ml灭菌蒸馏水得锥形瓶中,充分振摇,即为１:10稀释液。或放入盛有２25mｌ无菌蒸馏水得均质袋中,用拍击式均质器拍打２mｉn,制成1:10得样品匀液、3.2.２ 液体样品以无菌吸管吸取2５ml样品至盛有2２5ml无菌蒸馏水得锥形瓶(可在瓶内预置适当数量得无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成１:10得样品匀液。3。３ 霉菌与酵母菌计数3。３。1 用1ml无菌吸管或微量移液器吸取1:１０样品匀液１ｍｌ,沿管壁缓慢注于盛有9ml 稀释液得无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100得样品匀液、３。3.2 按3、3。1操作程序,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次１ｍｌ 无菌吸管或吸头。３。3.３ 根据对样品污染状况得估量,选择2个～3个适宜稀释度得样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时,吸取1ml样品...
