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免疫学检测法

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免疫学检测法免疫学检测技术的用途非常广泛,它们可用于有关免疫疾病的诊断、疗效评价及发病机制的讨论。如对传染病、免疫增殖性疾病、免疫缺损病、超敏反响、自身免疫病、移植排斥反响肿瘤的免疫学检测,对诊断、治疗均有很大帮助。此外在医学生物学讨论中对抗原性物质或细胞的定性、定量检查不仅推动了对各种免疫学现象的讨论,而且扩大免疫学与医学生物许多领域的联系。本章仅介绍常用免疫学检测方法的原理,简要过程和有用意义。第一节抗原或抗体的检测一、检测的原理借助抗原和抗体在体外特异结合后出现的各种现象,对样品中的抗原或抗体进展定性、定量、定位的检测。1.抗原与抗体的亲和力(affinity)原抗体的结合就像酶与底物的结合,激素与其受体的结合一样不是化学的反响,而是非共价键的可逆的结合。抗原决定簇和抗体分子可变区互补构型,造成两分子间有较强的亲和力。空间构型互补程度不同,抗原和抗体分子之间结合力强弱也不同。互补程度高,则亲和力强。此外,反响温度、酸碱度和离子浓度对抗原和抗体分子上各基因的解离性和电荷特性也有重要的影响,抗体与抗原决定簇之间的结合力大小可用亲合力来表示。高亲合力的抗体与抗原的结合力强,即使抗原浓度很低时也有较多的抗体结合抗原形成免疫复合物。2.抗原或抗体外检测原理根据抗原抗体结合形成免疫复合物的性状与活性特点,对标本中的抗原或抗体进展定性、定位或定量的检测。定性和定位检测比拟简单,即用的抗体和待检样品混合,经过一段时间,假设有免疫复合物形成的现象发生,就说明待检样品中有相应的抗原存在。假设无预期的现象发生,则说明样品中无相应的抗原存在。同理也可用的抗原检测样品中是否有相应抗体。对抗原或抗体进展定量检测时,以反响中参加抗原和抗体的浓度与形成免疫复物的浓度呈函数关系。〔1〕根据免疫复合物产生的多少来推算样品中抗原〔或抗体〕的含量:在一定的反响条件下,参加的抗体〔或抗原〕的浓度一定,反响产生的免疫复合物多少与待检样品中含有相应抗原〔或抗体〕量成正比。也就是抗体浓度一定时,免疫复合物越多则样品中的抗原量也越多。可用实验性标准曲线推算出样品中抗原〔或抗体〕的含量。如免疫单向扩散试验、免疫比浊试验和酶联免疫检测等都属于类方法。〔2〕抗原或抗体效价滴定的原理:当抗原抗体复合物形成多少不能反响抗原抗体反响强弱时,就不能以检测反响强度来对抗原或抗体进展定量。在实际工作中,把浓度低的反响成分〔抗原或抗体〕的...

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