实验二器械的清洗和消毒

实验 2 器械的清洗与消毒【实验原理】在组织培育过程中，离体细胞对任何毒性物质都十分敏感。毒性物质包括解体的微生物及细胞残余物 以及非营养的化学物质，因此对新采纳和重新使用的培育皿等培育用品都要严格清洗和消毒。【实验目的】学习并掌握细胞培育使用的器皿、器械的洗涤和消毒。【仪器、材料及试剂】1. 仪器：超净工作台，干燥箱，高压锅，过滤器。2. 材料：紫外灯，0.22 刖微孔滤膜。3. 试剂：75%酒精，0.1%新洁尔灭，高锰酸钾，重铬酸钾，浓硫酸。【操作步骤】1.清洗(1)玻璃器皿的清洗步骤：按浸泡 T 刷洗 T 浸酸 T 冲洗等四步程序进行。① 浸泡：新购进的玻璃器皿常带有灰尘，呈弱碱性，或带有铅、碑等有害物质，故先用自来水浸泡过 夜、水洗，然后再用 2%~5%盐酸浸泡过夜或煮沸 30min，水洗。要领：培育用后的玻璃器皿要立即泡入清 水中，使下道刷洗工作能顺利进行。用后的玻璃器皿常带有大量的蛋白质附着，干涸后不易刷洗掉，用后 要立即用清水浸泡。② 刷洗：用软毛刷、优质洗涤剂，刷去器皿上的杂质，冲洗晾干。要领：浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾 洗涤剂去器皿上的杂质、刷洗次太多，会损害器皿的表面光洁度，洗涤剂有使 pH 上升的趋势，所以易选 用软毛刷和优质洗涤剂。禁止用去污粉。因其中含有砂粒。会严重破坏玻璃器皿的光洁度。特别注意刷洗 瓶角部位。酸浸之前要把洗涤剂冲洁净。③浸酸：将器皿浸泡于清洁液 24h，如急用也不得少于 4h。清洁液由重铬酸钾、浓硫酸及蒸馏水配制 而成，具有很强的氧化作用，去污能力很强。经清洁液浸泡后，玻璃器皿残留的末刷洗掉的微量杂质可被 完全清除。④冲洗：先用自来水充分冲洗，吸管等冲流 10min，瓶皿需每瓶灌满、倒掉，反复 10 次以上。然后再 经蒸馏水漂洗 3 次，不留死角。晾干或烘干备用。对已用过的器皿，凡污染者必先经煮沸 30min 或放 3%盐 酸中浸泡过夜，未污染者可不需灭菌处理，但仍要刷洗、清洁液浸酸过夜，冲洗等。【附】清洁液的配制和使用注意事项1.清洁液配方见表 2-1）配方成分弱酸次强液强液重铬酸钾（g）50160清水（ml ）10102浓硫酸（ml ）901608硫酸浓度（v/v）8%14%80%① 选用耐酸塑料桶或不锈钢桶配制为宜。② 先将重铬酸钾溶于水（用玻璃棒搅拌助溶，有时不能完全溶解）。③ 缓缓加入浓硫酸，切忌过急，否则将产热而发生危险绝不可将重错酸饵液倒入浓硫酸中）。④ 清洁液配好呈棕红色，待变绿色时表明失效。由于清...