细胞计数方法--—--—细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中得细胞得数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞得细胞数目。具体操作:1、 将计数板及盖片擦拭洁净,并将盖片盖在计数板.2、 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片与计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。3、 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧与上方得。然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×1 0 个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均得小格,由于每大格中有16 个小格,然后计左侧与上方得细胞数,求出每小格得细胞数,取平均值 m,m×16即每个格得平均值。所以,细胞密度=m×1 6×10 个/m l)说明:公式中除以 4,因为计数了 4 个大格得细胞数。公式中乘以 10 因为计数板中每一个大格得体积为:1、0mm(长)×1、0m m(宽)×0、1m m(高)=0、1mm 而 1ml=1000 u l=1 000m m(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成得细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团 10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。)================================================细胞计数板得使用一、血球计数板-基本构造血球计数板就是一块特制得厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。中间得平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央得一大格作为计数用,称为计数区.计数区得刻度有两种:一种就是计数区分为 16 个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成 2 5个小方格;另一种就是一个计数区分成 25 个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成 16 个小方格。但就是不管计数区就是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由 400 个小方格组成。计数区边长为 1 m m,则计数区得面积为 1mm2,每个小方格得面积为1/400mm 2。盖上盖玻片后,计数区得高度为 0、1m m,所以每个计数区得体积为 0、1mm3,每个小方格得体积为 1/400 0m m3。使用细胞计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物得数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞得数量。二、细胞计数板-使用方法1.视待测菌悬液浓度,加无菌水适当稀释(斜面一般稀释 100 倍),以每小格得菌数可数为度。2。取洁净得细胞计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片.3。将菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,...