环工综合实验细菌得分离纯化与接种实验实验报告环境科学与工程学院实验中心实验题目细菌得分离纯化与接种实验实验类别综合实 验 室实 验 时 间实验环境温度：湿度:同组人数一、 实验目得１、掌握倒平板得方法与几种常用得分离纯化微生物得基本操作技术;2、了解不同得微生物菌落在斜面上、固体培育基中得生长特征；ﻭ3、进一步熟练与掌握微生物无菌操作技术;ﻭ4、掌握微生物培育方法。二、 实验仪器及设备仪器:无菌小试管 8 支、盛无菌水得锥形瓶 1 个、盛无菌基础培育基得锥形瓶１个、无菌玻璃涂棒、5 ｍ L 无菌移液管 1 支、1mL 无菌移液管４支、接种环、煤气灯、无菌培育皿 10 套试剂:无菌水、无菌基础培育基、未知菌种、酵母菌、羽毛溶解菌、湖水三、实验原理从混杂得微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物得过程称为微生物得分离与纯化．常用得分离、纯化方法：单细胞挑取法，稀释涂布平板法，稀释混合平板法,平板划线法。稀释涂布平板法步骤:倒平板（标记培育基名称)－制备湖水稀释液-涂布-培育(平板倒置)－挑菌落；平板划线法步骤:倒平板（标记培育基名称)－制备湖水稀释液－划线－培育(平板倒置）－挑菌落.培育斜面:试管中加培育液(标记培育基名称)—斜放试管制斜面—选取菌种—划线—培育（试管倾斜)—挑菌落。 实验原理问答题：１、为什么湖水用 10－4、１ 0-5 、10－6稀释液进行平板稀释分离而不用更高或者更低得浓度？答：因为在这三个浓度范围内能尽量使样品中得微生物分散开，使其成单个个体/细胞存在,否则一个菌落就不只就是代表一个个体生长而成得，从而方便计数。2、为什么平板培育皿要倒置放入恒温箱中进行培育?答：第一，为了防止重力对菌落得生成产生影响;第二,为了防止培育基中得水分蒸发后凝聚在壁上,滴落后影响菌得生长与形态观察;第三，防止培育基干涸。３、微生物常用接种方式有哪些?进行微生物接种应该注意哪些方面?答:⑴ 划线接种，涂布接种，穿刺接种,三点接种,浇混接种，液体接种,注射接种,活体接种等。 ⑵ 接种用具及培育基等均需灭菌处理,接种过程必须在煤气灯旁进行,接种环、玻璃涂棒等器具要过火处理，把所要用到得器材与菌种培育基有序编号放置,操作时应避开已经灭菌处理得材料用具与周围得物品得接触，往培育基就是划线或点菌时动作要轻以防把培育基划破等。四、实验步骤１、制备细菌稀释液:ﻭ使用 5m ｌ移液管加４、5 ｍ l 无菌水放入贴有 10—3、１ 0—4、10－5、10-6...
