基因工程专题复习一、基因工程的概念(p1）基因工程是指根据人们的愿望，进行严格的设计，通过 和 等技术，给予生物以 ，制造出 .基因工程是在 上进行设计和施工的，又叫做 。二、基因工程的原理及技术原理: 技术：(一)基因工程的基本工具1.“分子手术刀”—- (p4)（1）来源：主要是从 中分离纯化出来的.（2)功能：能够识别双链 DNA 分子的某种 ，并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开，因此具有 性。（3）结果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式： 和 。(p5）注意：大多数限制酶的识别序列由 核苷酸组成，少数由 组成.2。“分子缝合针"—— (p5）(1)两种 DNA 连接酶(E·coliDNA 连接酶和 T4DNA 连接酶）的比较：① 相同点：都缝合 键。② 区别：E·coliDNA 连接酶来源于 ,只能将双链 DNA 片段互补的 之间的磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA 连接酶能缝合 ，但连接平末端之间的效率较 。（2)与 DNA 聚合酶作用的异同：DNA 聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端,形成 .DNA 连接酶是连接 的末端，形成磷酸二酯键。（3）从结构上分析,为什么不同生物的 DNA 能够连接在一起？3.“分子运输车”——基因进入受体细胞的 （p6)(1）载体具备的条件：① 能在受体细胞中 。② 具有 限制酶切点,供外源 DNA 片段插入③ 具有 ,供重组 DNA 的鉴定和选择④ 对受体细胞无毒害⑤ ,以便提取和在体外进行操作，太大就不便操作。(2）最常用的载体是 ,它是一种裸露的、结构简单的、独立于 ，并具有 的 的双链 DNA 分子。注:基因工程操作中，真正被用作载体的质粒是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。（3）其它载体有： .(二）基因工程的基本操作程序第一步： (p8）1.目的基因是指： .(p9）2. 猎取目的基因的方法是① ，如可从基因文库中猎取.② ③ 扩增基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段，导入受体菌的群体储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。构建基因文库的目的:为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的目的基因.基因组文库：含有一种生物的 。部分基因文库(如 cDNA 文库）：含部分基因，可由 而来。3。PCR 技术扩增目的基因(p10）(1)原理： （2）过程：(p10 图解说明)第一步：加热至 90～95℃ 第二步:冷却到 55～60℃ ,第三步:加热至 70~75℃, 。（3）PCR 是 的缩写，是一种在生物体外 的核酸合成技术，这...
