丙泊酚及缺血预处理对大鼠肺缺血再灌注损伤中细胞凋亡及相关基因 Caspase-3 的影响目的通过丙泊酚及缺血预处理干预,观察丙泊酚及缺血预处理能否减轻肺缺血再灌注损伤和细胞凋亡,探讨其作用机制以及细胞凋亡动态变化和与肺功能损害的相关性,以期能对临床肺损伤保护以及手术中用药提供理论实验支持。方法建立 SD 雄性大鼠单肺缺血再灌注模型。健康雄性 SD 大鼠 84 只(山西医科大学实验动物中心),体重 250—300g,根据体重由小到大编 1—84 号,根据随机原则分 6 组,分为:① 假手术组(sham 组n=6),② 单纯缺血组(IS 组 n=6),③ 缺血再灌注组(IR 组 n=18),④ 缺血预处理组(IP 组 n=18),④ 丙泊酚干预组(Pro 组 n=18),⑥ 缺血预处理联合丙泊酚干预组(IP+Pro 组 n=18)。于缺血再灌注后 1 小时、2 小时、4 小时三个时间点实行右肺组织,做光镜和透射电镜观察组织,细胞形态及亚显微结构,确定凋亡发生。TUNEL 法测定肺组织凋亡指数。免疫组化观察肺缺血再灌注后不同时点肺泡细胞凋亡及损伤的变化与 Caspase-3 蛋白的表达。结果①电镜观察,单纯缺血组(IS 组)与假手术组(Sham 组)无明显异常,而缺血再灌注组(IR 组)肺组织改变明显,丙泊酚组(Pro 组)及缺血预处理组(IP 组)较缺血再灌注组肺损伤明显减轻,而 Pro+IP 组则较其它各组损伤减轻更加显著。②各组 Caspase-3 蛋白表达检测结果,IR 组比其他组的平均光密度值增高(p＜0.05),Pro 及 IP 组高于 IS 组和 Sham 组(p＜0.05),但较 IR 组低,而 IP+Pro 组明显降低(p＜0.01)。③ 各组肺凋亡指数检测结果,IR 组明显高于其他组(p＜0.05),而 Pro 组高于 IS 组和 Sham 组(p＜0.05),但低于 IR 组(p＜0.05),Pro+IP 组统计学差异更显著(p＜0.01)。④相关性分析,caspase-3 蛋白表达与凋亡指数 AI 呈正相关。结论①大鼠肺缺血再灌注损伤可造成肺脏细胞凋亡的发生。②肺缺血再灌注导致肺结构和功能损害,损害程度随再灌注时间延长而加重。③ 丙泊酚及缺血预处理可以通过抑制肺 IR 的 Caspase-3 表达,减少细胞凋亡,减轻肺 IR 损伤。④丙泊酚与缺血预处理联合可以增强各自单独作用。
