土壤微生物数量测定方法整理

土壤微生物得分离鉴定及数量测定（一）培育基得制备Ⅰ 测定微生物总量培育基：1、 细菌培育基（牛肉膏蛋白胨琼脂培育基)牛肉膏 Beefex ｔ ract ５。0g蛋白胨 P ｅ ptone 10．0gN ａ CI 5.0 ｇ蒸馏水 H ２0 1000m1琼脂 １ 5～2 ０ｇPH 7、2～７、4制备步骤：⑴ 在１ 00 mL 小烧杯中称取牛肉膏 5.0g，蛋白胨１ 0．0 ｇ，加 50 mL 蒸馏水,置电炉搅拌加热至牛肉膏，蛋白胨完全溶解、⑵ 向小铝锅中加入５ 00 ｍＬ蒸馏水，将溶解得牛肉膏，蛋白胨倒入铝锅中并用自来水洗 2～３次 、加入5、0 ｇ NaC １,在电炉上边加热边搅拌、⑶ 加入洗净得琼脂条，继续搅拌，加热至琼脂完全熔化,补足水量至１０ 0 ０ mL、⑷ 用Ｎ aOH 或 HC １调至 pH7、0、 用酸度计或用玻棒沾少许液体用精密ｐ H 试纸测定其 p Ｈ值,并用 10％Ｎa Ｏ H 调至所需ｐＨ值,必要时用滤纸或脱脂棉过滤。一般比要求得 pH 高出 0、２,因为高压蒸汽灭菌后，pH常降低.⑸ 根据不同需要，可将配好得培育基分装入配有棉塞得试管或三角瓶内。注意分装时避开培育基挂在瓶口或管口上引起杂菌污染。如液体培育基,应装试管高度得 1/4 左右；固体培育基装试管高度得１／５左右；装入三角瓶得量以三角瓶容量得一半为限。,塞好棉塞,装入小铁丝筐,然后用旧报纸将棉塞部分包好、 标签表明培育基得名称、配制日期等。 ⑹ 高压蒸汽灭菌,用０、1 Ｍ p ａ(１５ lb／i ｎ 2）121℃灭菌(１ 5－２ 0）30min、2、 放线菌培育基 （改良高氏 1 号琼脂培育基）可溶性淀粉 20gK Ｎ O ３ 1gＫ 2HPO4 0.5gMgSO4• 7H2Ｏ ０.5 ｇNa Ｃ l 0。５ g 原 0．0 ５ gFeS Ｏ 4• 7 Ｈ 2O 0.０ 1 ｇpH 7、2-7、4制备步骤：（1）计算 根据配方计算各种药品所需要得量，然后再分别称量。（2）称量 准确称量各种成分.（3）溶化 配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入少许沸水中,在火上加热,边搅拌边依次逐一溶化其她成分，溶化后,补足水分到 10 ０ 0 ｍ l,调 PH（可不调）。（4）分装、包扎、灭菌。注：各成分按配方顺序依次溶解，对于微量成分,可预先配成高浓度得溶液，方便配置时量得控制。配制时，先用少量冷水 ,将淀粉调成糊状,倒入少于所需水量得沸水中,在火上加热,边搅拌边依次逐一溶化其她成分，溶化后，补足水分到 1 ０ 00ml，调ｐH。 另:倒平板之前,在溶化得培育基中加重铬酸钾溶液，每３ 00mL ...