《医用基因工程》复习思考题第一章基因和基因组及基因工程的概念一、 名词概念① 移动基因(插入序列；转位子)；② 断裂基因；③ RNA 剪辑；④ 内含子(间隔序列)与表达子；⑤ 重叠基因；⑥ 反复序列；⑦ 假基因；⑧ 启动子与终止子；⑨ 起始位点、终止位点。二、 讨论题1. 什么叫基因?何谓基因的新概念?基因的重要功能是什么?2. 一种基因一种酶的提法妥否？3. 基因密码子三联体间是否存在着逗号？4. 基因表达的产物中，氨基酸序列相同时，基因密码子是否一定相同？为什么？5. 何谓转位子和转位作用?转位的后果如何?6. 基因中最小的突变单位和重组单位是什么？7. 基因工程应涉及哪些内容？何谓基因工程的四大里程碑和三大技术发明?8. 真核细胞基因组中常有内含子存在，能否在原核细胞获得表达？能，为什么？不能，为什么？第二章基因工程中常用的工具酶1. 什么是限制性核酸内切酶？2. 什么是 R/M 现象？如何解释？3. II 型核酸内切酶的基本特点有哪些？4. 影响 II 型核酸内切酶活性的因素有哪些？如何克服和避开这些不利因素？5. DNA 连接酶有哪两类？有何不同？6. 甲基化酶有哪两类？有何应用价值？7. 什么叫同尾酶、同裂酶？在基因工程中有何应用价值？8. 平末端连接的方法有哪些？(图示)9.Klenow 酶的特性和用途有哪些？举例说明。10. 反转录酶的特性有哪些？有何应用价值？11. 列举碱性磷酸酶 BAP/CAP 的应用之一。12. 列举末端核苷酸序列转移酶的应用之一。13. 质粒单酶切点的基因连接如何减少本底和防止自我环化和提高连接效率？14. 基因片段与载体的平末端连接的方法有哪些？15. 用寡核苷酸和衔接物 DNA 的短片段连接时为使基因内部的切点保护，常用何种办法解决？第三章基因克隆载体1. 基因工程常用的载体有哪 5 种？其共同特性如何？2. 什么是质粒？质粒分哪几种？有哪两种复制类型，质粒的分子生物学特性有哪些？3. 质粒存在的三种形式是什么？4. 分离质粒的基本环节有哪些？5. 分离纯化质粒的方法有哪几种？简述 CsCl 密度梯度(浮密度)分离法、碱变性法的原理，如何选择合适的分离方法？6. 作为理想质粒载体的基本条件有哪些？7. 什么叫插入失活，举例说明之。8. 构建 pBR322质粒载体的亲本质粒有哪些？9. 什么叫插入型和替换型噬菌体载体?插入型和替换型入噬菌体Cosmid 容纳外源 DNA 的最大容量是多少？10. 将外源性 DNA 克隆到-半乳糖苷酶失活的插入型入噬菌体上后...
