一、名词解释(20’)引物、克隆、探针、转化率、重组率、基因工程、分子克隆技术、限制性核酸内切酶1、基因工程基因工程是指重组 DNA 技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组 DNA 技术）；而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培育以及基因产物的分离纯化过程。2、基因表达是指细胞在生命过程中，把储存在 DNA 顺序中遗传信息经转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子3、限制性核酸内切酶能特异性识别双链 DNA 某段特别序列，并切割 DNA 双链的酶，主要存在于原核细菌中，主要作用是保护自身 DNA 不受限制，及破坏外源 DNA 使之迅速降解4、重组率：重组率 = 含有外源 DNA 的重组分子数 / 载体分子总数在常规实验条件下，重组率一般为 25-75%；重组率是衡量连接反应效率的重要指标，较高的重组率可以大大简化 DNA 重组的后续操作5、探针一小段单链 DNA 或 RNA 片段，用于检测与其互补的核酸序列，双链 DNA 加热变性成为单链，随后用放射性同位素(P-32 常用)、荧光燃料或酶标记成为探针1 U DNA 连接酶的酶活性在最佳反应条件下 15 ℃反应 1h，完全连接 1 mg l-DNA（Hind III 片段）所需的酶量二、选择题1、重组乙肝疫苗是由重组酵母或重组 CHO 工程细胞表达的乙型肝炎表面抗原，经纯化、灭活及加入佐剂吸附制成。前者为重组酵母乙型肝炎疫苗，后者为重组 CHO 乙型肝炎疫苗2、基因工程用于药物筛选模型的战略3、控制质粒拷贝数的意义是使外源蛋白在细胞内更稳定4、酵母作为受体，比大肠杆菌的优势在于大肠：原核酵母：真核，具有多种细胞器，在用于生产需加工分泌的蛋白质时比大肠杆菌有优势5、分子杂交的化学本质是形成氢键6、PCR 定点突变 DNA 的方法是碱基的添加、删除、点突变7、双链 DNA 切开后，两链末端基团是 5'-磷酸基和 3'-羟基的末端『五菱三枪』8、限制性核酸内切酶缓冲液中，DTT 的功能是还原，抗氧化。保护酶分子上的还原性基团，维持还原性环境，稳定酶活9、DNA 连接反应的最佳温度是 16℃10、聚乙二醇促进平头 DNA 分子连接的机理：促进 DNA 分子凝聚成聚集体的物质以提高转化效率11、大肠杆菌 DNA 聚合酶的用途：细胞复制 DNA 的重要作用酶，催化 DNA 合成Klenow 酶：又称 Klenow 片段，用枯草杆菌蛋白酶将 DNA 聚合酶 I 裂解为 36kD 和 76kD两个片段，大片...
