细菌计数参考材料一、检样稀释 1、以无菌操作用 1m Ｌ灭菌吸管吸取 1∶1 ０稀释液 1 ｍ L,注入含有 9mL灭菌生理盐水或其她稀释液得试管内，振摇试管混匀,做成 1∶１ 00 得稀释液． ２、另取１ mL 灭菌吸管，按上条操作依次做 1 ０倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用 1 支１ mL 灭菌吸管。 3、根据食品卫生标准要求或对检样污染情况得估量,选择三个稀释度，每个稀释度接种 3 管。二、基本原理 平板菌落计数法就是根据微生物在固体培育基上所形成得一个菌落就是由一个单细胞繁殖而成得现象进行得，也就就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时,先将待测样品作一系列稀释,再取一定量得稀释菌液接种到培育皿中,使其均匀分布于平皿中得培育基内,经培育后,由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目,即可换算出样品中得含菌数． 这种计数法得优点就是能测出样品中得活菌数。三、器材 大肠杆菌悬液,牛肉膏蛋白胨培育基, １ ml 无菌吸管,无菌平皿,盛有９ ml 无菌水得试管，试管架与记号笔等。四、操作步骤 1、编号:取无菌平皿 9 套,分别用记号笔标明 10—6、1 ０-7各 2 套。另取 7 支盛有 9mｌ无菌水得试管,排列于试管架上,依次标明 10—1、1 ０－2、１ 0-3、10—4、10—5、10—6、1 ０-7。２、稀释 用１ ml 无菌吸管精确地吸取１ ml 大肠杆菌悬液放入 10－1得试管中,注意吸管尖端不要碰到液面，另取 1 支吸管将管内悬液来回吸吹三次,吸时伸入管底,吹时离开水面,使其混合均匀。换一支吸管自 1 ０—1试管吸 1ml 放入 1 ０-2试管中,吸吹三次,……其余依次类推。整个稀释过程如图Ⅷ－3。 ３、取样 用３支 1 ｍ l 无菌吸管分别精确地吸取 1 ０—6、10-７得稀释菌液 0.1m ｌ，对号放入编好号得培育皿中。 ４、计数 培育２ 4 小时后,取出培育皿,算出同一稀释度三个平皿上得菌落平均数,并按下列公式进行计算: 每毫升中总活菌数＝同一稀释度三次重复得菌落平均数×稀释倍数×1 ０ 一般选择每个平板上长有 3 ０—300 个菌落得稀释度计算每毫升得菌数最为合适。同一稀释度得三个重复得菌数不能相差很悬殊。由１ 0—6、１ 0—7两个稀释度计算出得每毫升菌液中总活菌数也不能相差悬殊,如相差较大,表示试验不精确。 平板菌落计数法,所选择倒平板得稀释度就是很重要得,一般以三个稀释度中得第二稀释度倒平板所出现得平均菌落数在 50 个左右为最好． 平板菌落计数法得操作就是先将...
