细菌计数参考材料一、检样稀释 1、以无菌操作用 1m L灭菌吸管吸取 1∶1 0稀释液 1 m L,注入含有 9mL灭菌生理盐水或其她稀释液得试管内,振摇试管混匀,做成 1∶1 00 得稀释液. 2、另取1 mL 灭菌吸管,按上条操作依次做 1 0倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用 1 支1 mL 灭菌吸管
3、根据食品卫生标准要求或对检样污染情况得估量,选择三个稀释度,每个稀释度接种 3 管
二、基本原理 平板菌落计数法就是根据微生物在固体培育基上所形成得一个菌落就是由一个单细胞繁殖而成得现象进行得,也就就是说一个菌落即代表一个单细胞
计数时,先将待测样品作一系列稀释,再取一定量得稀释菌液接种到培育皿中,使其均匀分布于平皿中得培育基内,经培育后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可换算出样品中得含菌数. 这种计数法得优点就是能测出样品中得活菌数
三、器材 大肠杆菌悬液,牛肉膏蛋白胨培育基, 1 ml 无菌吸管,无菌平皿,盛有9 ml 无菌水得试管,试管架与记号笔等
四、操作步骤 1、编号:取无菌平皿 9 套,分别用记号笔标明 10—6、1 0-7各 2 套
另取 7 支盛有 9ml无菌水得试管,排列于试管架上,依次标明 10—1、1 0-2、1 0-3、10—4、10—5、10—6、1 0-7
2、稀释 用1 ml 无菌吸管精确地吸取1 ml 大肠杆菌悬液放入 10-1得试管中,注意吸管尖端不要碰到液面,另取 1 支吸管将管内悬液来回吸吹三次,吸时伸入管底,吹时离开水面,使其混合均匀
换一支吸管自 1 0—1试管吸 1ml 放入 1 0-2试管中,吸吹三次,……其余依次类推
整个稀释过程如图Ⅷ-3
3、取样 用3支 1 m l 无菌吸管分别精确地吸取 1 0—6、10-7得稀释菌液 0
1m l,对号放入编好号得培育皿中
4、计数 培育2 4 小时后,取出