第二节 基因工程的原理和技术几个问题的拓展延伸:1.目的基因的检测和表达有什么区别
应该要注意的是,目的基因的检测和标记基因的检测的目的是不同的,标记基因的检测是为了鉴定外源基因的导入是否成功,而目的基因的检测要更进一步的对目的基因在受体细胞中的拷贝情况、表达情况进行检测
而且在基因操作的不同时期或根据受体细胞的不同情况,可以使用不同的检测手段
例如,在导入初期,可以利用标记基因来直观地显示导入是否成功,确定导入成功而目的基因没表达之前,可以采用 DNA 分子杂交的方法来确定目的基因是否稳定存在,在鉴定表达时,可以将 DNA-RNA 分子杂交、蛋白质分子杂交和个体水平的检测综合利用,以确定目的基因表达的水平或强度
2.目的基因进入受体细胞是否就一定能表达
受体细胞中目的基因的存在和表达是有区别的
目的基因进入受体细胞并整合到受体细胞基因组中是表达的前提,但是被导入和整合并不意味着被表达
由于各种因素的影响,有时还需要通过一定手段去促使基因的表达,例如对基因非编码区进行修饰以促进该基因的表达
3.原核基因能否用于真核细胞的基因改良
真核基因能否在原核细胞中表达
都可以,例如人的胰岛素基因可以在大肠杆菌中表达,苏云金芽孢杆菌的晶体蛋白基因可以导入棉花细胞育出抗虫棉
但是要注意,由于原核基因和真核基因的结构上存在一定的差异,在进行操作之前必须对基因进行处理
4.基因工程中的目的基因一般是什么基因,目的基因是不是就是外源基因
目的基因一般指人们感兴趣的基因,例如苏云金芽孢杆菌的晶体蛋白基因,人类的胰岛素基因,在操作中,往往是将目的基因导入异种生物细胞,此时,对受体细胞而言,目的基因就是外源基因
5.怎样理解基因工程引起的可遗传变异是基因重组
因为外源基因导入受体细胞并与受体细胞基因组整合之后,导致受体细胞中的基因与外源基因组合,这种组合是一种全新的组合,可以看作是基因重组