基因基本操作程序—基因表达载体的构建 学习指南解题提示（1）不同的限制酶切割后可能产生相同的黏性末端。（2）用不同的限制酶切割获得的平末端，在 DNA 连接酶的作用下均可以连接上。但用不同的限制酶切割获得的黏性末端，必须黏性末端能够碱基互补配对才能连接上。课堂形式预告 在自主测试的解析过程中，结合交流平台收集到的，同学们在自学过程中提出的困惑，以及拓展延伸问题，展开师生与生生互动，讨论解决问题。学习任务 达成 目标 “基因表达载体的构建”在《普通高中生物课程标准》属于“简述”层次的知识性目标，在福建省高考的《考试说明》中属于理解层次，要求学生能在较复杂的情境中综合运用其进行分析、判断和推理。 本微课自主学习的具体任务是：简述构建基因表达载体的必要性和基本要求；简述启动子、终止子的化学本质和功能；理解标记基因在筛选含目的基因的重组质粒中的应用。 导学 问题 1. 基因表达载体构建的意义是什么？ 2. 基因表达载体是由哪几个部分组成的？ 它们的作用各是什么？ 3. 启动子的方向和目的基因的表达方向是一致的，如果方向相反，还会转录、翻译出我们所需的蛋白质吗？ 4. 怎样利用标记基因进行重组 DNA 的筛选？ 5、如果基因表达载体中只有 1 个标记基因，则在选择限制酶的时候，酶切位点能不能在标记基因内部，为什么？如果有 2 个标记基因，切割时应注意什么？（可结合自主测试第 2 题思考） 自主 测试1、如图为表达载体的模式图，若结构 X 是表达载体所必需的，则 X 最可能是( ) A．荧光蛋白基因 B．启动子C．限制酶 D．DNA 连接酶2、基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。根据图示判断下列操作,正确的是（ ）A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割3、将 PVY 病毒外壳蛋白基因(PVY-CP)导人马铃薯，并使之表达即可获得抗 PVY 病毒马铃薯。图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作，PVY-CP 可以从质粒 A 中获取；质粒 B 是选用的运载体，另已知部分限制酶识别序列和切割位点：BamH IHind ⅢBgl IISma IG↓GATCCCCTAG↑GA↓AGCTTTTCGA↑AA↓GATCTTCTAG↑ACCC↓GGGGGG↑CCC请结 合 图像，运用所学知识回答...
