1.2 基因工程的基本操作程序目标导航 1.结合教材图 1-6,整体把握并说出基因工程的基本操作程序。 2.理解获取目的基因的途径及基因表达载体的构建。3.理解目的基因导入受体细胞的方法、检测与鉴定目的基因的方法。重难点击 1.基因工程的基本操作程序。2.获取目的基因的途径及基因表达载体的构建。3.目的基因导入受体细胞的方法、检测与鉴定目的基因的方法。课堂导入方式一:抑制疾病传播的转基因蚊子巴西等拉美国家深受致倦库蚊的危害。致倦库蚊可携带多种病毒和寄生虫,能够传播脑炎丝虫等传染病,而这些传染病常年在拉美国家肆虐。为了抑制疾病的传播,巴西科学家培育出了一种转基因雄性致倦库蚊。科学家在雄性致倦库蚊体内植入一种特殊基因,当具该基因的转基因雄蚊与野生雌蚊交配时,这种基因可以进入雌蚊的基因组,并使雌蚊死亡,从而减少了该种蚊子的数量,达到抑制疾病传播的目的。怎样才能最终得到转基因雄蚊呢让我们一起来学习基因工程的基本操作程序吧!方式二:师:出示我国有知识产权的转基因抗虫棉的培育图解:问:转基因抗虫棉的培育需要哪些步骤?学生看图并回答:首先要获得目的基因,其次将目的基因连接到 Ti 质粒上,然后将重组的Ti 质粒导入受体细胞,最后要重建转基因植物。根据学生回答补充:还需检测抗虫基因是否已经进入棉花植株,并由此引出基因工程的四部曲。一、目的基因的获取1.基因工程的基本操作程序(1)目的基因的获取。(2)基因表达载体的构建。(3)将目的基因导入受体细胞。(4)目的基因的检测与鉴定。2.目的基因的获取(1)目的基因:主要是指编码蛋白质的基因,也可以是一些具有调控作用的因子。(2)常见方法① 从基因文库中获取基因文库的种类② 利用 PCR 技术扩增目的基因a.原理:DNA 双链复制 。b.条件:引物、DNA 模板、Taq 酶 、四种脱氧核苷酸。c.过程:目的基因 DNA 受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在DNA 聚合酶 作用下进行延伸,如此重复循环多次。d.结果:每一次循环后,目的基因的量可以增加一倍,即成指数形式扩增(约为 2n,n 为扩增循环的次数)。③ 人工合成法:如果基因比较小,核苷酸序列又已知,可借助 DNA 合成仪 用化学方法直接人工合成。合作探究1.从基因文库中获取目的基因(1)cDNA 文库是从某种生物的某一细胞中提取出 mRNA,经反转录过程获得的基因文库,为什么该基因文库仅含有该生物的部分基因?答案 由于基因的选择性表达,某种生物的...