专题 1 细胞工程突破 1 几种重要酶的比较 种类项目 限制酶DNA 连接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA 分子DNA 分子片段脱氧核苷酸DNA分子作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键作用特点切割目的基因及载体,能专一性识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开将双链 DNA 片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上将 DNA 两条链之间的氢键打开 作用结果形成黏性末端或平末端形成重组 DNA 分子形成新的 DNA 分子形成单链 DNA分子注意 在基因工程中反(逆)转录酶也常被使用。反(逆)转录酶又称 RNA 指导的 DNA 聚合酶,是以 RNA 为模板合成 DNA 的酶。反(逆)转录酶催化的反应叫反(逆)转录。在这个过程中,遗传信息流动的方向是从 RNA 到 DNA,正好与转录过程相反,故称反转录。突破体验1.下图为 DNA 分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA 连接酶、解旋酶、RNA 聚合酶作用的正确顺序是( )A.①②③⑤④B.①②④③⑤C.①④②③⑤D.①④③⑤②答案 C解析 图中①是限制性核酸内切酶切割 DNA 分子;②是 DNA 连接酶将两个 DNA 分子的缝隙缝合起来;③是在解旋酶的作用下 DNA 分子双链解开成单链;④为 DNA 复制时以解开的单链为模板,在 DNA 聚合酶的作用下合成脱氧核苷酸子链;⑤是以 DNA 的一条链为模板,在RNA 聚合酶作用下转录产生 RNA。突破 2 易混概念辨析基因工程的基本操作程序中存在多组易混的概念,它们是学习中的难点;只有把它们的区别和联系搞清楚,才能正确掌握关于基因工程的基本操作程序的知识。下面是对几组易混概念的辨析。1.基因文库、基因组文库、部分基因文库(1)从定义上区分① 基因文库:将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。基因文库是指储存有某种生物基因的菌群的总称。② 基因组文库:如果基因文库中含有一种生物的所有基因,这种基因文库叫做基因组文库。③ 部分基因文库:指含有一种生物的一部分基因的基因文库,如 cDNA 文库。(2)从范围上区别:基因文库包含基因组文库和部分基因文库。基因组文库有某一种生物的全部基因,它的范围要大于部分基因文库。2.启动子、终止子、起始密码...