第二节 动物的克隆一、动物细胞的培养和克隆形成1．动物细胞的培养(1)过程(填图)： (2)培养瓶内细胞生长特点：① 贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁生长。② 接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。(3)原代培养与传代培养：① 原代培养：从机体取出后立即进行的细胞或组织培养为原代细胞。② 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到 两个或两个以上的培养瓶中继续培养(10 代以外的培养)。2．细胞系和细胞株(1)细胞系：可连续传代的细胞。原代培养物在首次传代时就成为细胞系，能连续培养下去的细胞系称为连续细胞系，不能连续培养下去的细胞系称为有限细胞系。二倍体细胞通常为有限细胞系。连续细胞系被认为是发生转化了的细胞系，大多数具有异倍体核型。有的连续细胞系是恶性细胞系，具有异体致瘤性；有的连续细胞系获得了不死性，但保留 接触抑制现象，不致癌。(2)细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。细胞株一般具有恒定的染色体组型、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性等。可以连续多次传代的细胞株称为连续细胞株，传代次数有限的细胞株称为有限细胞株。3．克隆培养法1.动物克隆的技术基础主要是动物细胞与组织培养。2.动物细胞培养的过程：――→――→―→―→3.动物细胞培养的原理是细胞增殖。4.动物细胞培养一般选用胚胎或幼龄动物的组织，细胞在培养过程中会出现细胞贴壁(生长)和细胞的接触抑制现象。5.原代培养物在首次传代时就成为细胞系；通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，称为细胞株。6.把一个细胞从群体中分离出来培养，使之繁殖成一个新的细胞群体的技术称为克隆培养法。(1)概念：把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，也称为细胞克隆。(2)特点：由于来源于一个共同的祖细胞，所以称为纯系，也就是克隆。(3)提高细胞克隆形成率的措施：选择适宜的培养基、添加血清(胎牛血清最好)、以滋养细胞支持生长、激素(胰岛素等)刺激、使用 CO2培养箱、调节 pH 等。二、动物的细胞融合技术及其应用1．细胞融合(1)概念：是指在一定的条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程。(2)原理：细胞膜的流动性。(3)诱导融合的方法：① 物理方法和化学方法：电激法、聚乙二醇等。② 生物方法：灭活的病毒(如仙台病毒)。2．细胞杂交...
