实验四 α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测1．固定化酶(1)概念：将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。(2)方法：吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。2．枯草杆菌的 α淀粉酶的固定化(1)枯草杆菌的 α淀粉酶作用的条件：最适 pH 为 5.5 ～ 7.5 ；最适温度为 50 ～ 75 _℃。(2)方法：吸附法，介质是石英砂。(3)淀粉水解作用的检测原理：――→――→――→遇碘显蓝色 遇碘显红色 遇碘不显色3．α淀粉酶固定化实验步骤 ↓ ↓ ↓滴加 KI I 2 溶液，观察颜色，稀释 1 倍后再观察颜色 ↓1．如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶？提示：可在试管中加入 1 mL 可溶性淀粉，再加几滴淀粉酶柱流出液，保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色，则流出液中没有淀粉酶。2．耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途？提示：可以在高温下使淀粉水解快，而且酶不会因高温而失活，所以可在一些需要高温加1.固定化酶就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。2.酶固定化的方法有吸附法、共价偶联法、交联法、包埋法等。3．固定化酶的优点：(1)既能使酶与反应物接触，又能使酶与产物分离；(2)固定在载体上的酶可以被反复利用。4.淀粉遇碘显蓝色，糊精遇碘显红色，麦芽糖遇碘不显色。热同时又要水解淀粉的反应中使用。3．判断下列叙述的正误(1)固定化 α淀粉酶可永久使用(×)(2)用固定化 α淀粉酶进行淀粉水解实验时不需考虑温度及 pH 的影响(×)(3)α淀粉酶固定化实验结束后，将固定化柱放在常温下即可(×)1．酶的固定化方法名称原理图示包埋法将酶或微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中，分为凝胶包埋法和微囊化法化 学 结合法利用共价键、离子键将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上，分为交联法、共价结合法、离子结合法吸附法通过物理吸附作用，把酶或细胞固定在醋酸纤维素、琼脂糖、多孔玻璃或聚丙烯酰胺等载体上2．直接使用酶和固定化酶比较类型直接使用酶固定化酶优点催化效率高，低耗能、低污染等a.酶既能与反应物接触，又能与产物分离；b．固定在载体上的酶还可以被反复利用不足a.对环境条件非常敏感，容易失活b．溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本c．反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成是通过一系列的酶促反应...
