第二章 克隆技术 第二节 植物的克隆植物克隆技术的基础是植物组织培养，植物组织培养是将离体的植物细胞、组织、器官通过诱导产生愈伤组织并最终发育成完整的植株的过程。一、植物细胞全能性和组织培养方法1．植物组织培养程序(1)配制含有适当营养物质和植物生长调节剂的含 0.7%～1%琼脂的培养基，倒在灭菌试管中凝固成半固体。该步骤主要是为植物组织培养创造适宜的条件，原因如下：① 培养的细胞不能进行光合作用，只能从培养基中获得必需的营养物质。② 生长调节剂有利于诱导细胞的分化。③ 半固体培养基有利于固定生长的植物体。(2)从消毒的根、茎或叶上切取一些小的组织块。消毒的作用有以下几点：植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物组织细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、根、芽，最终形成完整的植株。 ① 避免细菌与组织块争夺营养物质。② 防止细菌产生的有毒物质影响组织块的发育。③ 获得无病毒的植株。(3)将组织块放在固体培养基上进行培养，获得愈伤组织。① 脱分化：已经分化定型的细胞，经过诱导成为重新恢复了分裂能力(即分生状态)细胞的过程。② 愈伤组织：分化的细胞经过脱分化形成的相对分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织。(4)以适当配比的营养物质和生长调节剂诱导愈伤组织，由愈伤组织发育成胚状体，进而形成新植株。其过程如下：离体的植物组织细胞――→愈伤组织――→根、芽―→植物体2．植物细胞全能性的体现全能性高低的比较：受精卵(最高)＞卵细胞(精子)＞体细胞；植物体细胞＞动物体细胞；胚胎干细胞＞其他干细胞＞体细胞。(1)植物细胞全能性的含义：植物细胞具有发育成完整个体的潜能。即使高度成熟和分化的细胞，都保持分生状态的能力，都具有遗传上的全能性。(2)全能性的基础：每个体细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体的全部基因。 (3)全能性程度：不同种类的植物或同种植物不同基因型个体之间遗传性的差异，细胞全能性的表达程度大不相同。(4)全能性降低的因素① 由于染色体畸变、细胞核变异或非整倍体产生；② 激素平衡被打破或细胞对外源生长物质的敏感性发生改变；③ 缺乏成胚性的细胞系。(5)植物细胞表达全能性的步骤：成熟细胞→愈伤组织→出根出芽→完整植株。(6)克隆成功的注意事项① 深入探讨特定植物细胞全能性的表达条件；② 在植物克隆实验研究中，尽量选择性状优良、细胞全能性表达充分的...
