第一部分 微生物的利用梳理知识 构建纲要整合重点 提升技能突破 1 划线分离法和涂布分离法的比较项目划线分离法涂布分离法操作通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面(也是分离纯化的方法)。每一次划线都从上次划线末端开始，目的是获得由单个细菌形成的标准菌落将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落优点可以观察菌落特征，对混合菌进行分离可以计数，可以观察菌落特征缺点不能计数(1)吸收量较少，较麻烦(2)平板不干燥，效果不好，容易蔓延用途多用于菌种的纯化(1)多用于筛选菌株(2)用于平板培养基的回收率计数易错提醒 两种分离法的易错点拨(1)在稀释涂布平板操作中，每个步骤都要注意无菌操作，以防培养基被污染，影响实验效果。(2)每一稀释倍数菌液都至少要涂布三个平板，作为实验重复，求平均值，若其中有菌落数与其他实验差距悬殊者，应舍弃该实验数据，不进行统计、计算。(3)平板冷凝后，皿盖上会凝结成水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置 ，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基中造成污染。突破体验1.微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙、丙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图，请据图回答有关问题：(1)上图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，它称为 。(2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 。(3)上图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是 A→B→ (用字母和箭头表示)；找出图乙中两处错误的操作： 、 (用字母表示)。(4)上图丙是某同学用平板划线法接种后的培养基培养 12 h 后的实验结果，如果培养基上 ，则说明无菌操作基本符合要求。答案 (1)倒平板 (2)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 (3)G→F→E→C→D→H C D (4)生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点突破 2 培养基的配制和无菌技术1.培养基的制备(以 LB 固体培养基为例)计算→称量→融化→灭菌→倒平板。2.无菌技术(1)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等，常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法等，对不同的...
