第二节 分子生物学技术学习导航明目标、知重点难点尝试 PCR(多聚酶链式反应)技术的基本操作
(重、难点)体验 PCR 这一常规分子生物学实验方法
(难点)理解 PCR 的原理，讨论 PCR 技术的应用
(重点) [学生用书 P56])一、阅读教材 P83分析使用 PCR 仪的安全措施1．严禁在 PCR 仪运行过程中打开池盖，否则会造成仪器的永久损坏
2．仪器运行时，样品池及池盖内表面温度较高，当心灼伤
3．仪器运行时，加热器内腔为高温、高压环境，严禁触及
4．仪器运行过程中如果发出尖锐的刺刮声音，请立刻停止运行，检查是否有微量离心管断裂等故障
5．仪器运行过程中如果没有反应，请切断电源，进行检查
6．必须保持样品池内部的清洁，可用蘸有体积分数为 95%的酒精棉签擦拭相关部位
7．仪器必须放置在 PCR 实验室 里，操作者在操作的时候必须遵循 PCR 实验室的相关规定，做好穿防护服、戴防护手套等相关防护措施
8．当仪器接通电源后，打开外壳或移走部件可能会造成人员伤害，因此，在进行任何调整、替换、保养或维修之前，请切断所有的电源
二、阅读教材 P84完成多聚酶链式反应程序1．物质准备：向离心管中加入模板 DNA 、引物和 4 种脱氧核苷酸以及 Taq DNA 聚合酶
2．变性：在 94 ℃高温下，作为模板的双链 DNA 解旋为单链 DNA
3．退火(复性)：反应体系的温度降至 55 ℃，引物与单链 DNA 上的特定部位相互配对
4．延伸：反应体系的温度回升到 72 ℃左右，按照单链 DNA 上的脱氧核苷酸序列，4种脱氧核苷酸按照碱基互补配对原则，在 TaqDNA 聚合酶的作用下连接到引物之后，使引物链延伸，形成互补的 DNA 双链
三、阅读 P85～87分析目的 DNA 片段的体外扩增与鉴定1．DNA 片段的 PCR 扩增(1)准备器材：PCR 仪、台式高速离心机、0
