第 2 课时 提取和鉴定 DNA一、实验原理1．析出原理(1)DNA 能溶解在 NaCl 溶液中，且溶解度随着 NaCl 浓度的变化而改变
(2)在 NaCl 的物质的量浓度为 0
14 mol/L 时，DNA 的溶解度最低
(如下图)2．DNA 提纯原理：DNA 不溶于乙醇溶液，而细胞中的某些物质能溶于乙醇溶液
3．鉴定原理：DNA 遇二苯胺在沸水浴加热的条件下呈蓝色
二、实验器材与试剂1．实验材料：鸡血细胞
(以鸡血为例)2．试剂与仪器：2 mol/L 的 NaCl 溶液、二苯胺试剂、蒸馏水、烧杯、试管、玻璃棒、纱布、体积分数为 95%冷却的乙醇溶液、酒精灯、三脚架、石棉网等
三、实验方法与步骤1．制备鸡血细胞液(1)先配备 10%的柠檬酸钠溶液，按 180 mL 新鲜鸡血混合 100 mL 10%柠檬酸钠溶液的比例，立即将血液与柠檬酸钠充分混合，同时用玻璃棒搅拌以免凝血
(2)将充分混合的鸡血细胞液置于 4 ℃冰箱内，静置一天，使血细胞自行沉淀后获得鸡血细胞液
2．粗提取鸡血的 DNA(1)获取核物质：取 5～10 mL 鸡血细胞液注入 50 mL 烧杯中，加蒸馏水 20 mL，用玻璃棒搅拌 5 min，使血细胞过度吸水破裂，细胞核内物质释放出来，然后用纱布过滤取其滤液
(2)溶解 DNA：取浓度为 2_mol/L 的 NaCl 溶液 40 mL 加入滤液中，用玻璃棒沿同一方向轻轻搅拌，使其混合均匀
(3)析出 DNA 丝状物：沿烧杯内壁缓慢加入蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌
由于 NaCl 溶液浓度的下降，使得 DNA 溶解度下降，蛋白质溶解度上升，DNA 析出成白色丝状物，当丝状物不再增加时，停止加入蒸馏水
(4)滤取 DNA 丝状物：用多层纱布过滤，取纱布上 DNA 的丝状物
(5)DNA 丝状物再溶解：取含 DNA 的丝状物放入桡杯内，加入 2_mol
