专题一 基因工程第 2 节 基因工程的基本操作程序 【学习目标】1.基因工程原理及基本操作程序。(重点)2.获取目的基因的途径及基因表达载体的模式结构。3.目的基因导入受体细胞的方法、检测与鉴定目的基因的方法。(重点)【自学自测】一:基因工程的第一步——目的基因的获取1.目的基因:主要是指_____________________的基因,也可以是___________________。2.获取方法:(1)从基因文库中获取:① 基因文库的含义:将含有某种生物不同基因的许多_____________________,导入 的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。② 基因文库的类型:a._________________:含有一种生物所有的基因;b._________________:含有一种生物的一部分基因,如_____________。(2)利用 PCR 技术扩增目的基因:① 含义:PCR 是____________________的缩写。它是一项在生物体外_____________________的核酸合成技术。② 原理:_____________________。③ 前提条件:_______,是根据已知目的基因的核苷酸序列合成的。④ 条件:DNA 模板(上有目的基因)、引物、能量、__________________________和 4 种脱氧核苷酸。 ⑤ 扩增过程:变性→复性→延伸→循环。⑥ 结果:每次循环后目的基因的量增加一倍,即呈_______________形式扩增。(3)人工合成法:①条件:基因比较小,____________已知。②方法:通过__________用化学方法直接人工合成。二:基因工程的第二步(核心)——基因表达载体的构建1.构建目的:使目的基因在受体细胞中______________,并且可以_________给下一代。_________________。2.组成 启动子:位置:______________,功能:______________识别和结合的部位,驱动基因____________。终止子:位置:______________,功能:_______________,本质:______________。 标记基因:鉴别受体细胞中是否含有_______________,从而将含有_______________的细胞筛选出来。三:基因工程的第三步——将目的基因导入受体细胞1.转化:目的基因进入__________________内,并且在受体细胞内__________________和__________的过程。 2.转化方法(1)导入植物细胞:①_______________法(最常用):主要适应于双子叶植物和裸子植物。②_______________法:常用于单子叶植物。③_______________法:目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。(2)导入动物细胞:①方法:_________________技术。②常用受体细胞:_____________。(3)导入微生...