第二节 基因工程的原理和技术一、基因工程的基本原理1．基本原理：让人们感兴趣的基因(即目的基因)在宿主细胞中稳定和高效地表达。2．基因工程的变异类型：基因工程属于可遗传变异中的基因重组。3．变异特点：实现性状定向改造。二、基因工程的基本操作步骤1．获得目的基因(1)目的基因：人们所需要的基因，如人的胰岛素基因、植物的抗病基因等。(2)获取方法：① 如果目的基因的序列是已知的，可用化学方法合成目的基因，或者用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因。② 如果目的基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一个包括目的基因在内的基因文库，从基因文库中找到目的基因。2．形成重组 DNA 分子(1)通常用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体 DNA(如质粒)，形成相同的粘性末端。(2)用 DNA 连接酶 将目的基因和载体 DNA 连接在一起，形成重组 DNA 分子。3．将重组 DNA 分子导入受体细胞(1)常用的受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞等。(2)导入方法举例：用质粒作为载体，宿主细胞应该选择大肠杆菌，用氯化钙处理大肠杆菌，增加其细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。4．筛选含有目的基因的受体细胞(1)筛选原因：并不是所有的细胞都接纳了重组 DNA 分子 。(2)筛选方法举例：质粒上有抗生素如四环素的抗性基因，所以含有这种重组质粒的受体细胞就能够在有四环素的培养基中生长，而没有接纳重组 DNA 分子的细胞则不能生长，这样就能筛选出含有重组 DNA 分子的受体细胞。1.基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因(即目的基因)在宿主细胞中稳定和高效地表达。2.获取目的基因的方法：① 如果目的基因的序列是已知的，可用化学方法合成目的基因 ，或者用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因。② 如果目的基因的核苷酸序列是未知的，可以从基因文库中获取。3.操作步骤：① 获得目的基因；② 形成重组 DNA 分子；③ 重组 DNA 分子导入受体体细胞；④ 筛选含有目的基因的受体细胞；⑤ 目的基因表达。5．目的基因的表达目的基因在宿主细胞中表达，产生人们需要的功能物质。1．基因工程主要操作步骤的顺序是( )① 目的基因表达 ②筛选含有目的基因的受体细胞 ③重组 DNA 分子导入受体体细胞 ④形成重组 DNA 分子 ⑤获得目的基因A．⑤③②④① B．⑤②④①③C．⑤④③②① D．⑤③④①②解析：选 C 基因工程的主要操作步骤顺序是：获得目的基因→形成重组 DN...
