第 3 课时 导入、检测和鉴定目的基因[学习导航] 1.理解目的基因导入受体细胞的方法。2.掌握检测与鉴定目的基因的方法。[重难点击] 1.目的基因导入受体细胞的方法。2.检测和鉴定目的基因的方法。方式一 通过前面的学习，我们了解了基因工程中目的基因的获取及基因表达载体的构建。在目的基因与载体连接成重组 DNA 分子以后，下面的重要工作主要是将其导入受体细胞进行扩增和筛选，获得大量的重组 DNA 分子，这就是外源基因的无性繁殖，即克隆(cloning)。由于外源基因与载体构成的重组 DNA 分子性质不同、宿主细胞不同，将重组 DNA 导入宿主细胞的具体方法也不相同。方式二 目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测和鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。以上步骤完成后，在全部的受体细胞中，真正能够摄入重组 DNA 分子的受体细胞是很少的。因此，必须通过一定的手段对受体细胞中是否导入了目的基因进行检测。检测的方法有很多种，例如，大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因，当这种质粒与外源 DNA 组合在一起形成重组质粒，并被转入受体细胞后，就可以根据受体细胞是否具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因。重组 DNA 分子进入受体细胞后，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达过程。一、导入目的基因将目的基因导入受体细胞的方法和过程受体细胞植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法显微注射法感受态细胞法过程将目的基因插入 Ti 质粒的T － DNA 上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染色体的 DNA 上→表达将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物Ca2＋处理细胞→感受态细胞→重组的基因表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收 DNA 分 子1．农杆菌转化法的分析(1)将基因表达载体导入农杆菌细胞时，应怎样处理农杆菌细胞？答案 基因表达载体(重组质粒)导入农杆菌细胞时，要用 Ca2＋处理农杆菌细胞，使其处于感受态，利于重组质粒的导入。(2)在用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞的过程中，为什么一定要将目的基因插入到 Ti 质粒的 T－DNA 上？答案 农杆菌中的 Ti 质粒上的 T－DNA(可转移的 DNA)可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞的染色体 DNA 上。2．植物基因工程常用的受体细胞为什么可以是体细胞，而动物基因工程一般只用受精卵？答案 植...
