实验一 大肠杆菌的培养和分离一、微生物1．概念：微生物是结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物。2．利用：生产抗生素，制作发酵食品，治理环境污染等。二、培养基1．概念人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。2．营养构成各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐及生长因子，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。3．培养基的类型(1)按物理性质分：固体培养基、半固体培养基、液体培养基。(2)按目的用途分：鉴别培养基、选择培养基。4．微生物生长对特殊营养物质的要求(1)细菌培养基要用蛋白胨和酵母菌提取物来配置，细菌喜荤。(2)霉菌培养基一般用无机物配制或加蔗糖的豆芽汁即可，霉菌喜素。5．微生物生长对 pH 的要求细菌要求在中性偏碱(6.5～7.5)的环境中生长；真菌要求在中性偏酸(5.0～6.0)的环境中生长。三、无菌技术1．获取纯净培养物的方法获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，具体操作如下：(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。1.培养基中需含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。2..本实验用 LB 液体培养基扩大培养大肠杆菌，用 LB 固体培养基分离大肠杆菌。3.消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物；而灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。4..实验室常用煮沸消毒法、紫外线或化学药剂进行消毒；常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌及过滤灭菌等。5.固体培养基的配制过程为：(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。2．消毒和灭菌(1)概念：[填表]项目方法结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物(不包括芽孢和孢子)煮 沸 消 毒 法 、 巴 氏 消 毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、过滤灭菌(2)常用方法：[连线]四、分离细菌的两种方法比较项目划线分离法涂布分离法工具接种环玻璃刮刀原理划线过程中接种环上的菌液逐渐减少，到划线最后部分细菌间距离加大，经培养后能得到单菌落将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀...
