第 2 课时 分离特定的微生物并测定其数量[学习导航] 1.认识各种微生物形成的菌落特征。2.学会利用涂布平板法分离、培养微生物,并能测定其数量。3.掌握利用选择培养基分离特定微生物的方法。[重难点击] 简述分离、培养微生物的方法及数量测定。一、微生物分离和培养的基本理论1.纯培养物培养在实验室中利用选择培养基可以筛选和分离某种微生物,然后在高度稀释的条件下,在固体培养基上培养该微生物形成单个菌落,即由一个微生物(如某种细菌)形成的单个菌落。单个菌落即为纯培养物,可用于科学研究。2.分离特定的微生物(1)平板分离法① 概念:能将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面,每个孤立的活微生物体经过生长、繁殖均可形成单个菌落。② 分离、培养微生物最常用的培养基是琼脂固体培养基。③ 类型:平板分离法有多种,如涂布平板法、混合平板法等。a.涂布平板法分离细菌:将待分离的样品进行 10 倍系列稀释,取一定稀释度的样品 0.1 mL倒入预先制备好的培养基平板中,用无菌玻璃涂布器将样品涂布均匀,恒温培养一段时间,以获得单个菌落的方法。b.混合平板法分离细菌:将待分离的样品进行 10 倍系列稀释,取一定稀释度的样品 0.1 mL与熔化冷却至 50 _℃ 左右 的培养基混合均匀,将混合液倒入无菌培养皿中制成平板,培养一段时间,以获得单个菌落的方法。(2)选择培养分离① 概念:科学家针对某种微生物的特性,设计一个特定的环境,使之特别适合这种微生物的生长,而抑制其他微生物的生长。这种通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术称为选择培养分离。② 依据原理:不同的微生物有不同的营养需求或对某种化学物质有不同的敏感性。③ 举例a.要分离耐高温菌,可在高温条件下进行培养。b.要分离对某种抗生素具有抗性的菌种,可在加有该抗生素(如链霉素或青霉素)的平板上进行分离。c.在培养基中加入质量分数为 10%的酚,可以抑制细菌和霉菌的生长。d.运用将纤维素作为唯一碳源和能源的培养基,可以有效地分离能分解纤维素的细菌。e.运用无氮培养基(培养基完全不含氮元素),可选择能固氮的细菌。f.运用只含尿素而不含其他氮元素的培养基,可以选择能分解尿素以获取氮的微生物(能合成脲酶的微生物可以分解尿素)。3.观察各种微生物形成的菌落(1)菌落:指单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度,形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。(2)菌落特征:不同微生物在特定培养基上生...