第二节 分离特定的微生物并测定其数量学习导航明目标、知重点难点 了解、分析选择分离微生物的条件。(重点) 简述选择分离微生物并进行计数的方法。(重、难点) 学会从土壤中分离出能分解纤维素的微生物的方法。(重点) [学生用书 P14])一、阅读教材 P17~18分析微生物的分离1.原理:在实验室中利用选择培养基可以筛选和分离出某种微生物,然后在高度稀释的条件下,在固体培养基上培养该微生物形成的单个菌落,即为纯培养物。2.方法:平板分离法,包括涂布平板法和混合平板法。3.选择培养分离:科学家针对某种微生物的特性,设计一个特定的环境,使之特别适合某种微生物的生长,而抑制其他微生物的生长。这种通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术,称为选择培养分离。4.根据菌落特征初步分离(1)菌落的含义:是指单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度,形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。(2)菌落特征:不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落一般都具有稳定的特征,如菌落的大小、形状、边缘特征、隆起程度、颜色等,这些可以作为对微生物进行分类、鉴定的重要依据。二、阅读教材 P19~22完成土壤微生物的分离、培养与数量测定1.涂布平板法培养和计数土壤微生物(1)准备实验器材:所有玻璃器皿灭菌前需要用适当浓度的浓硫酸浸泡 24 h。(2)采集土壤,制备悬液① 制备悬液:称取 0.5 g 土壤样品,倒入盛有 50 mL 无菌水的锥形瓶,振荡 20 min,使土样充分打散,即为 10-2 g/mL 的土壤悬液。② 等比稀释:用无菌移液管吸取 0.5 mL 土壤悬液注入盛有 4.5 mL 无菌水的 1 号试管,配成 10-3 g/mL 的土壤悬液。取另一支无菌移液管吹吸 1 号试管 3 次,使悬液均匀,再吸取 0.5 mL 注入盛有 4.5 mL 无菌水的 2 号试管,配成 10-4 g/mL 的土壤悬液。以此类推,依次配制成 10-5 g/mL、10-6 g/mL、10-7 g/mL、10-8 g/mL 的土壤悬液。(3)选择适于分离特定微生物的培养基:利用不同微生物代谢特性的不同,通过选择培养基选出所需要的特定微生物。(4)接种:用 3 支无菌移液管分别吸取 10-8 g/mL、10-7 g/mL、10-6 g/mL 的土壤悬液各 1 mL 加入培养皿中,每个浓度设置 3 个 重复,并充分振荡混合均匀,用涂布平板法进行分离。(5)培养与观察:将培养皿倒置于 37_℃恒温箱中培养 1~2 d,观察细菌菌落。(6)计数菌落:培养 1~2 d 后...