第一章 无菌操作技术实践知识系统构建必背要语1.细菌培养基的配制过程：配制培养基→调节 pH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面。2.消毒和灭菌的实质不同：前者只杀死绝大多数微生物，后者则杀死所有的微生物。3.微生物的接种方法有穿刺接种、斜面接种、涂布平板接种和平板划线接种。4.用涂布平板法形成的细菌菌落通常仅在平板表面生长，而混合平板法形成的细菌菌落出现在平板表面及内部。5.微生物分离的原理是提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物生长。方法是使用选择培养基。6.统计菌落数目的方法可分为活菌计数法和显微镜直接计数法。前者的原理是涂布平板法接种，一个菌落代表一个单细胞；后者的原理是利用血球计数板，在显微镜下计数。7.植物组织培养的基本过程：外植体――→愈伤组织――→胚状体――→试管苗。8.生长素、细胞分裂素是启动生长、细胞分裂、脱分化、再分化的关键激素。进行组织培养时要配备三种培养基，分别是愈伤组织形成培养基、诱导生根培养基和诱导生芽培养基。9.天竺葵的组织培养过程：准备(器具准备、试剂准备)→配制培养基→灭菌→取材与接种→观察与记录→转接培养。规律方法整合整合一 微生物的纯培养技术与无菌操作技术1.微生物的纯培养技术(1)自然环境中的微生物是混杂在一起的，因此分离获得纯培养物的基本原理：首先采用一定方法将单个的细胞与其他细胞分离开，进而提供细胞合适的营养和条件，使其生长成为可见的群体。(2)微生物的分散主要采用稀释的方法，而固体培养基能够使分散的细胞固着于一定的位置 ，与其他的细胞分离，从而生长成为一个单细胞来源的群体即纯培养物。① 平板划线法：将合适的无菌培养基倒入无菌培养皿中，冷却后制备成平板。平板划线法中细胞的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的划线和移动过程中，产生的单个细胞在培养基表面生长的后代就是纯培养物。② 涂布平板法：该法用在将细胞接种到培养基之前，通过液体稀释的方法分散细胞，最常用的液体稀释方法为 10 倍系列稀释，随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。然后，将灭完菌冷却到 45～50 ℃的培养基倒入无菌培养皿中冷却形成平板，然后选择细胞得以分散的合适稀释度的菌悬液加到平板中央，以玻璃涂布器将之均匀地涂布于整个平板上培养即可。2.无菌操作要求(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等...
