植物组织培养技术植物组织培养（Plant tissue culture）是指在无菌条件下，将离体的植物器官（根、茎、叶、花等）、组织（如形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞），以及原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株，统称为植物组织培养。植物组织培养的过程可概括为：茎尖、胚及子房等器官做外植体可不经脱分化直接形成试管苗。植物组织培养技术是生物技术的重要组成部分，在生产实践及基因工程、遗传转化等研究中有重要应用前景。植物脱毒及离体快繁，花药培养与单倍体育种、幼胚培养与试管受精抗性突变体的筛选与体细胞无性系变异，植物产品的工厂化生产等方面的研究和应用，均必须借助植物组织培养技术的基本程序和方法。通过本实验，要求同学掌握植物组织培养操作技术；了解外植体脱分化及再生的过程；理解植物细胞全能性。一、试材与用具1．植物材料：花生、烟草、苹果、大白菜、玉米等。2．实验室：准备室、接种室、培养室等。3．仪器设备：高压灭菌锅（器）、光照培养箱、振荡培养箱、天秤、酸度计、超净工作台等。4．器械及用具：镊子、手术刀、接种针、细菌过滤器、记号笔等。5．玻动器皿：三角瓶、培养瓶、培养皿、量筒、容量瓶等。二、方法步骤（一）培养基的制备1．母液的配制在植物组织培养中，不同的植物，不同的器官和组织，不同的研究目的，使用不同的培养基，培养基尽管千差万别，按其性质和含量来分主要由以下几部分组成：①无机营养，包括大量元素和微量元素；②有机物质；③铁盐；④碳水化合物；⑤天然复合物；⑥激素；⑦琼脂（固体培养基）；⑧其他添加物。在培养基的配制中，对各组分的成分，常先要按其需用量扩大一定倍数，配制成母液（表 2－1）。配制母液时应注意以下两个方面：（1）配制大量元素母液时，为了避免产生沉淀，各种化学物质必须充分溶解后才能混合，同时混合时要注意先后顺序，把钙离子（Ca2+）、锰离子（Mn2+）、钡离子（Ba2+）和硫酸根（SO42-）、磷酸根（PO43-）错开，以免形成硫酸钙、磷酸钙等沉淀，并且各种成分要慢慢混合，边混合边搅拌。（2）各类激素用量极微，其母液一般配制成 0.1～1mg/ml。有些激素配制母液时不溶于水，需经加热或用少量稀酸、稀碱及 95%酒精溶解后再加水定容。常用激素类的溶解方法如下：萘乙酸（NAA）：先用热水或少量 95%酒精溶解。吲哚丁酸（IBA）：先用少量 95%酒精溶解后加水，如溶解不完全再加热。激动...
