植物种苗脱毒技术——茎尖脱毒的实例（一）、茎尖脱毒 1、茎尖脱毒的依据。 病毒在植物体内分布是不均一的 ，越接近生长点约（0.1-1mm 区域），病毒浓度越稀，因此有可能采用小的茎尖离体培养而脱除植物病毒。 2、茎尖培养法脱除植物病毒的技术关键 （1）、被脱毒植物携带病毒的诊断及其在体内的分布 脱毒之前，应了解植物携带何种病毒，病毒在体内的分布位置，以确定培养茎尖的大小 （2）、母体植株的选择和预处理 母体的选择： 欲脱毒材料的品种典型性：关系到脱毒以后的脱毒苗是否保持原品种的特征特性 [来源:学#科#网] 植体健康程度选择：应选感病轻、带毒量少的健康植株作为脱毒的外植体材料，这样更容易获得脱毒株。 外植体预处理： （3）、茎尖的剥离 在剥取茎尖时，把茎芽置于解剖镜下（8~40 倍），一只手用镊子将其按住，另一只手用解剖针将叶片和叶原基剥掉，解剖针要常常蘸入 90%酒精，并用火焰灼烧以进行消毒。但要注意解剖针的冷却，可蘸入无菌水进行冷却。当一个闪亮半圆球的顶端分生组织充分暴露出来之后，用解剖刀片将分生组织切下来，为了提高成活率，可带 1-2 枚幼叶，然后将其接到培养基上。接种时确保微茎尖不与其他物体接触，只用解剖针接种即可。剥离茎尖时，应尽快接种，茎尖暴露的时间应当越短越好，以防茎尖变干。可在一个衬有无菌湿滤纸的培养皿内进行操作，有助于防止茎尖变干。 [来源:学,科,网 Z,X,X,K] 将接种好的茎尖置于 25℃左右的温度下。每天以 16 小时 2000-3000lx 的光照条件下培养。由于在低温和短日照下，茎尖有可能进入休眠；所以较高的温度和充足的日照时间必须保证。微茎尖需数月才能成功。 继代培养得到足够的检测苗、进行病毒检测。 [来源:Zxxk.Com]（4）、脱毒效果检测 A 指示植物鉴定(indicator test plants) 所谓指示植物是指具有能够辨别某种病毒的专化性症状的寄主植物。 每种病毒都有自己敏感的植物，例如： 马铃薯病毒的敏感植物有千日红、黄花烟、心叶烟、毛叶曼佗罗 大丽花病毒的敏感植物为：矮牵牛、黄瓜、苋色蓠 菊花病毒：矮牵牛、豇豆 指示植物鉴定病毒的方法 a.摩擦接种法： 取培养植株的叶片置于研钵中，加入少量的水和等量的 0.1mol/L 磷酸缓冲液（pH 7.0），磨成匀奖，将其涂抹在指示植株叶片上，在指示植物的叶片撒上金刚砂，通过轻轻摩擦使汁浸入叶片表皮细胞而又不损伤叶片。5 分钟后用清水清洗叶面。将指示植株放于防蚜虫网罩的温...
