课题 3 血红蛋白的提取和分离教材内容解读要点 1 如何分离不同种类的蛋白质 根据蛋白质各种特性的差异分离蛋白质。如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等。要点 2 凝胶色谱柱（1）定义凝胶色谱法也称作分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。（2）凝胶所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成的，如葡聚糖或琼脂糖。（3）分离原理在小球体内部有许多贯穿的通道，当相对分于质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。要点 3 缓冲溶液（1）缓冲溶液的缓冲作用在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液 pH 的影响，维持 pH 基本不变。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同 pH 范围内使用的缓冲液。（2）缓冲溶液的意义生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的 pH 下进行的，为了能够在实验室条件下准确模拟生物体内的过程，就必须保持体外的 pH 与体内的基本一致。要点 4 电泳（1）定义 电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。（2）电泳原理许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的 pH 下，这些基团会带上正电或负电。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分于带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。（3）电泳过程中影响粒子运动快慢的因素① 粒子带电荷的多少。粒子带电荷越多在电场中运动越快。② 粒子的质量。粒子质量越小在电场中运动越快。③ 粒子的形状。呈球形或近球形的粒子比链状粒子运动快。（4）荷质比粒子在电泳时运动的快慢主要取决于电荷与质量比，简称荷质比。荷质比值越大的粒 子电泳时运动越快。要点 5 实验操作蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。血液由血浆和各种血细胞组成，其中红细胞最多。在红细胞的组成中，约 90%是血红蛋白。血红蛋白由四个肽链组成，包括两个-肽链和两个-肽链（1）样品处理① 红细胞的洗涤洗涤红细胞的目的：去除杂蛋白，以利于后续...
