第34讲微生物的利用和酶的应用[考试标准]知识内容加试要求一、微生物的利用1
大肠杆菌的培养和分离2
分离以尿素为氮源的微生物掌握程度参考本考试标准中的:二、(二)3
实验与探究能力二、酶的应用3
果汁中的果胶和果胶酶4
α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测考点一大肠杆菌的培养和分离1.培养基与无菌技术(1)培养基的成分和分类①微生物的营养:碳源、氮源、生长因子、水和无机盐
②培养基的类型:a.按物理性质分:固体培养基、半固体培养基、液体培养基
b.按目的用途分:鉴别培养基、选择培养基
(2)消毒和灭菌的区别项目条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌2
细菌两种分离方法的比较项目划线分离法涂布分离法工具接种环玻璃刮刀原理通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面
在数次划线后培养,可以分离到由一个细菌细胞繁殖而来的肉眼可见的细胞群体,即菌落将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养
在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细菌细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落特点方法简单,但不适宜计数单菌落更易分开,但操作复杂些目的使培养基上形成单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体——菌落3
大肠杆菌的培养和分离(1)大肠杆菌①特性:革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌
②细菌的繁殖:以分裂的方式繁殖,分裂速度很快
(2)细菌的扩大培养扩大培养用LB液体培养基,划线分离用LB固体平面培养基
(3)分离培养基灭菌倒平板接种划线分离培养观察50mLLB液体培养基和50mLLB固体培养基及培养皿