梧桐的植物组织培养VIP免费

梧桐的植物组织培养植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，是一项无性繁殖的技术。植物的组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织。器官或細胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。标签：组织培养;再生;产品技术1前言梧桐[Firmianasimplex（L.）F.W.Wight]又名青桐。因树干绿色或青色而得名，为梧桐科（Sterculiaceae）梧桐属（FirmianaL.）的落叶乔木，高达15m。树干挺直，树冠圆形。树皮光滑，灰绿色，一般不裂，小枝粗壮，翠绿色。单叶互生，掌状3～5裂。花单性或杂性，顶生圆锥状花序，花后心皮分离成5果，在成熟前即开裂呈舟形;种子2～4，球形，棕黄色，大如豌豆，表面皱缩，着生在果瓣的边缘。花期6～7月，果期9～10月。植物组织培养，即植物无菌培养技术，是利用植物离体器官（根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（如形成层、花药组织、胚乳及皮层等）或细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体，在适宜和无菌的人工控制的培养基及光温等条件下进行人工培养，使其增殖、生根而形成完整的植株，是植物细胞具有全能性的表现。培养的离体材料称为外植体。植物组织培养的应用：（1）植物脱毒苗培育和植物离体快速繁殖是目前植物组织培养技术应用最广泛、最有效的两个方面。（2）制造“人工种子”。所谓“人工种子”，是指以植物组织培养得到的体细胞胚状体为材料，经过人工胚乳和人工种皮包装的种子。“人工种子”在适宜条件下可萌发长成幼苗，成本低廉。“人工种子”是植物组织培养一个新的应用方向。（3）植物有用化合物的工业化生产。植物有用化合物包括药物、蛋白质、脂肪、糖类、橡胶、香精油、色素等。这些化合物许多都是高等植物的次生代谢物，利用组织培养方法，培养植物的某些器官或愈伤组织，并筛选出高产、高合成能力、生长快的细胞株系，以进行工业化生产植物有用化合物，是一条行之有效的途径。（4）增加遗传变异性，改良作物。主要表现在单倍体育种;胚培培养、子房培养、胚珠培养;突变体的选择和应用;体细胞杂交和遗传工程。（5）在植物种质资源保存和交换上的应用。利用组织培养进行植物快速繁殖及无病毒种苗生产不仅能够获得显著的经济效益，同时能够挽救珍稀濒危物种，而且能够帮助解决药用植物野生资源缺乏而造成的短缺问题。2材料与方法2.1外植体准备外植体从植株上取种子，把梧桐的种子用自来水冲洗，并加少量市售洗涤剂加以洗涤，用自来水冲洗4～5次，然后用蒸馏水洗涤1～2次，把材料移到超净工作台上，先用70%酒精浸泡30秒，再用0.1%升汞溶液消毒8分钟，取出后用无菌水冲洗接种材料5次。2.2培养基制备MS培养基母液配制：1）大量元素配制表1大量元素（10倍）（定溶1000ml）名称分子式用量硝酸铵NH4NO316.5g硝酸钾KNO319.0g磷酸二氢钾KH2PO41.7g硫酸镁MgSO4.7H2O3.7g氯化钙CaCl2.2H2O4.4g（无水3.3g）2）微量元素配制表2微量元素（200倍）（定溶1000ml）名称分子式用量钼酸钠Na2MnO4.2H2O50mg硫酸铜CuSO4.5H20.5mg氯化钴CoCl2.6H20.5mg硫酸锌ZnSO4.7H2O1720mg碘化钾KI166mg硼酸H3BO31240mg硫酸锰MnSO4.4H2O4460mg3）有机物质母液配制表3有机物质母液（200倍）（定溶500ml）名称用量甘氨酸200mg盐酸硫胺素40mg烟酸50mg盐酸吡哆素50mg4）铁盐母液配制表4铁盐母液（200倍）（定溶500ml）名称分子式用量硫酸亚铁FeSO4.7H2O2.78g乙二胺四乙酸二钠Na-EDTA3.27g5）肌醇母液（100倍）：肌醇1g定溶100ml。6）植物激素母液配制初级培养基以MS培养基为基础，分别加入不同种类和浓度的细胞分裂素（6-BA）和生长素（IBA）（见表1），每个处理接种20瓶。诱导及分化培养基中加3%蔗糖，琼脂8g/l，调整pH值为5.8。壮苗培养基为不加激素的MS培养基。配置好的培养基经过常规灭菌后备用。表5植物激素母液名称用量浓度备注6BA50mg0.5mg/ml加少量HCl溶解定溶100mlIBA50mg0.5mg/ml加少量95%乙醇加热水100ml为了在短时间内筛选出最适合梧桐快速增殖的培养基，我们设置了4种以MS培养基为基础添加了4种不同质量浓度的植物激素。表6初级培养时激素种类及用量Tab.1Kindandconcentr...