专题十五现代生物科技专题第1讲基因工程和细胞工程全国卷5年考情导向考点考题考情1.基因工程的诞生(Ⅰ)1.近五年的全国卷高考试题中对于基因工程的考查频度较高，侧重考查操作工具的种类、功能以及操作基本程序的应用等。动物细胞工程技术中的核移植技术及单克隆抗体的制备也有所考查。2．题目常借助简洁的文字材料或模式图等考查有关基因工程、动物细胞工程的原理、技术手段等，尤为注重对教材中一些关键词的填充及对结论性语句的准确表述等。3．备考时，应从以下四个方面入手复习：(1)列表比较法掌握限制酶、DNA连接酶和载体的作用。(2)实例分析法理解基因工程的原理和过程。(3)列表比较法理解两个不同，即植物组织培养和动物细胞培养的不同、植物体细胞杂交与动物细胞融合的不同。(4)图解法分析并掌握单克隆抗体制备过程。2.基因工程的原理及技术(含PCR)(Ⅱ)2016·丙卷T40：限制酶的识别序列特点、DNA连接酶的种类及功能、基因表达载体的组成2016·乙卷T40：质粒载体具备的基本条件及目的基因的筛选2015·卷ⅠT40：目的基因的获取方法2014·卷ⅡT40：基因组文库和cDNA文库的概念及基因工程的操作程序2013·卷IT40：基因工程的操作工具及农杆菌转化法中农杆菌的作用2012·课标卷T40：基因工程的三种操作工具及应用3.基因工程的应用(Ⅱ)2014·卷ⅡT40：利用转基因技术培养耐旱植物4.蛋白质工程(Ⅰ)2015·卷ⅡT40：蛋白质工程的基本途径2013·卷ⅠT40：蛋白质工程的概念5.植物的组织培养(Ⅱ)2013·卷ⅡT40：植物体细胞杂交的过程6.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)2016·甲卷T40：核移植技术的操作过程、原理及结果，动物细胞培养中遗传物质的变化7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)2014·卷ⅠT40：杂交瘤细胞的制备考点串讲1|基因工程与蛋白质工程1．(2016·全国乙卷)某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后，与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有________(答出两点即可)，而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是____________；并且________________和________________的细胞也是不能区分的，其原因是________。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落，还需使用含有________的固体培养基。(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于________。【解析】(1)质粒作为载体，应具备的基本条件有：有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段(基因)插入其中；在受体细胞中能自我复制，或能整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制；有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择；等等。(2)在培养基中加入氨苄青霉素进行筛选，其中未被转化的大肠杆菌和仅含环状目的基因的大肠杆菌，因不含氨苄青霉素抗性基因而都不能在此培养基上存活，二者不能区分。含有质粒载体的大肠杆菌和含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌中都含有氨苄青霉素抗性基因，都能在此培养基上存活，二者也不能区分。若要将含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌进一步筛选出来，还需要使用含有四环素的固体培养基。(3)某些噬菌体经改造后作为载体，导入受体细胞后，其DNA复制所需的原料来自于受体细胞。【答案】(1)能自我复制、具有标记基因(答出两点即可)(2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长含有质粒载体含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长四环素(3)受体细胞2．(2016·全国丙卷)图(a)中的三个...
