d植物内生菌分离处理方法文献材料前处理第一次消毒第二次消毒(含三消)处理对照咖氓甘培养基刘明志,2011南方红豆杉的老树皮、幼茎、叶截成2〜3cm长的小段,去除树皮层75%酒精中浸泡30s0
1%升汞溶液浸泡8min,无菌水冲洗3〜5次研磨成匀浆液,倾倒于PDA上切成0
5cm左右的块,接种于有100mgL-1青霉素和链霉素的PDA固体培养基表面
每皿10块刘金花2011黄花蒿的根,茎,叶叶切成1cm,茎和叶切成1cm左右小段(两端皆有切将根,茎,叶一次用75%酒精浸1min1%的次氯酸钙溶液浸泡1min,用无菌水冲洗5次置于含双抗的VA培养基平板培养待切口处长出菌落后转至PDA培养基进行内生真菌的分离宋培勇2011珙桐茎、叶和叶柄将采集的新鲜珙桐的茎、叶和叶柄分别用流水冲洗,风干表面水分,剪成小块或小段,无菌水漂洗2次75%酒精浸泡1min再用2%NaClO溶液中浸泡3min,转入75%酒精中浸泡30s,接着用无菌水漂洗3次,取最后一次漂洗液涂布NA平板作为对照平放于NA平板上,28°C培养2-3d孙传伯2011台湾7303毛豆全株采回的样本用自来水洗净,并用无菌纸吸干水分,并用无菌纸吸干水分,切取支根110cm长的小段,须根切成115cm的小块用75%酒精浸泡5min、7min、10min分别用0
1%升汞溶液处理4min、6min、8min进行表面灭菌,此试验分别重复3次
最后用无菌水冲洗4次,
最后用无菌水冲洗4次将组织块在研钵中充分研磨成匀浆最后一次冲洗液涂3种不同培养基平板,26~28e下培养2~3d,筛选出最佳消毒时间和培养基,将表面消毒彻底棉花根部切块放入灭菌研钵中用无菌水冲洗4次,取上清液涂抹于培养基上
以无菌水冲洗为对照试验
取上清匀浆涂抹于3种不同培养基上,取匀浆涂布于不同培养基平板,每浓度重复3次,然后将培养皿置于26〜28e恒温箱中培养2~3d,观