实验室常用溶液配制VIP免费

实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解，抽滤后ImL分装到离心管中，于-3O°C冻存X-gal:贮存浓度为20mg/mL称取20mgX-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中，-30C中用锡箔纸包裹后避光保存，不需要过滤除菌IPTG:贮存浓度为0.84mol/L称取2gIPTG溶于8mL超纯水中，用水定容到1OmL，用0.22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中并于-3OC保存CaCl2:贮存浓度为1mol/L称取1.11gCaCl(或者CaCl:2H2O1.4698g)溶于8mL超纯水中，定容到10mL，用0,22um的一次性滤过器过滤除菌，1mL分装到离心管中，并于-3OC保存LB培养基:胰蛋白胨(Tyrtone)10g/L酵母提取物(YeastExtraction)5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6,然后高压蒸汽灭菌，注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶:将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/LTris-Cl(PH7.5)、15mmol/LNaCl中，配成10mg/mL的浓度，于100C加热15min，缓慢冷却至室温，分装成小份保存于-20CBradford贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG2500.35g室温下可储存，一般4CBradford工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4C超声破碎缓冲液KCl300mM22.37gKH2PO450mM6.81gEDTA1mM0.292g(EDTA-2Na-2H2O)0.372g定容至1L,调pH至8.0包涵体洗涤液KCl300mM22.37gKH2PO450mM6.81gEDTA5mM1.46g(EDTA-2Na-2H2O)1.86g尿素2M120gTritonX-1000.5%5ml脱氧胆酸钠盐0.1%1g定容到1L调pH至8.0匀浆缓冲液(pH=7・5)成分：20mMHEPES0.002mol=0.476g加入0.952g1.5mMMgCl20.00015mol=0.0036g加入0.0072g0.2mMEDTA0.00002mol=0.00584g加入0.01168g0.1MNaCl0.01mol=0.58g加入1.16g0.5mM钒酸钠0.00005mol=0.0092g加入0.0184g加100mL水进行溶解，NaOH调pH至7.50.2mMDTT总体积500yL加入O.lyL0.4mMPMSF总体积500yL加入20yL1%SDS加入50pL10%SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入，SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液，溶于0.01M乙酸钠(pH=5.2)中，过滤除菌PMSF配成10mM母液，溶于异丙醇10*PBSNaCl80.0669gKCl2.0129gNa2HPO414.1960gKH2PO42.4496g水定容至1L,使用时稀释10倍，用NaOH调pH至7.4Startwith800mLofdistilledwatertodissolveallsalts.AdjustthepHto7.4withHCl.Adddistilledwatertoatotalvolumeof1liter.Theresultant1xPBSshouldhaveafinalconcentrationof10mMPO43-,137mMNaCl,and2.7mMKClIfusedincellculturing,thesolutioncanbedispensedintoaliquotsandsterilizedbyautoclaving(20min,121°C,liquidcycle).Sterilizationmaynotbenecessarydependingonitsuse.PBScanbestoredatroomtemperatureorinthefridge.However,concentratedstocksolutionsmayprecipitatewhencooledandshouldbekeptatroomtemperatureuntilprecipitatehascompletelydissolvedbeforeuse.转膜缓冲液(含有SDS)1L剂量甘氨酸2.9gTris5.8gSDS0.37g甲醇200mL水800mL10x蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris碱(Mr121.14)30.2g甘氨酸(Mr75.07)188gSDS(Mr288.38)10g加水至1L用时稀释10倍即可30％丙稀酰胺1L剂量丙烯酰胺290gN,N'-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中，加热至37°C溶解，补足体积至1L,过滤，且pH不大于7.01MTris-Cl(pH6.8)60.55gTris碱溶解于400ml蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500ml1.5MTris-Cl(pH8.8)90.83gTris碱溶解于400ml蒸馏水，溶解后调pH值，总体积为500m1。加约14.5ml浓盐酸，再调整到500ml体积1MDTT用20mL0.01mol/L乙酸钠溶液(pH=5.2)溶解3.09gDTT,过滤除菌后分装考马斯亮蓝R-250染液在90mL甲醇：水(1:1)和10mL冰乙酸混合液中溶解0.25g考马斯亮蓝R-250,过滤后室温保存蛋白酶K(20mg/mL)灭菌的50mMTris(pH8.0),1.5mM乙酸钙溶解，配置成浓度为20mg/mL的溶液，-20C保存流式缓冲液PBS+5%FBS+0.02%sodiumazideWater45mL20%叠氮钠50吐10*PBS5mLFBS2.5mL文献常见配方：PBS+0.5-1%BSA(5-10%FBS)+0.1%sodiumazide酸酐称取50g重铬酸钾（KCrO4）溶于80mL双蒸水中，90°C中溶解2h,每半小时搅拌促进溶解，溶解完成后，加入1000mL硫酸，分装于2个瓶子中。注意使用过程中，如果其中一瓶的效果不好，不要混合使用。使用5次，就要重配。滴管酸酐中浸泡24h，自来水冲洗至无明显可...