CD147在胃癌细胞SGC7901增殖VIP免费

RNA干扰抑制CD147表达对人胃癌细胞SGC7901增殖、侵袭和顺铂敏感性的影响2022.5.18王书奎MD,PhD南京医科大学附属南京第一医院第一页，共四十九页。报告内容研究背景研究目标实验方法与结果实验结论第二页，共四十九页。一、研究背景第三页，共四十九页。胃癌概况胃癌最常见的恶性肿瘤之一，恶性肿瘤致死占第二位。其恶性程度较高，转移扩散严重，多数患者就诊时已属中晚期，因而死亡率较高。第四页，共四十九页。MMP简介肿瘤的侵袭和转移是一个复杂的过程，其中细胞外基质和基底膜的降解是肿瘤转移过程中的重要步骤。这与细胞外基质金属蛋白酶〔extracellularmatrixmetalloproteinase，MMP〕的参与密不可分。第五页，共四十九页。MMP是一个锌离子依赖的蛋白酶家族，目前已发现26种。MMP的主要功能是降解细胞外基质。肿瘤细胞利用MMP的基质降解能力迁移到其他部位。在肿瘤与间质交界处，MMP往往高表达。第六页，共四十九页。20世纪80年代，Biswas实验室从人肺癌细胞株LX-1的细胞膜上别离得到了一种58kDa的糖蛋白，具有刺激成纤维细胞合成MMP-1的功能，将其命名为肿瘤胶原酶刺激因子〔tumorcollagenasestimulatingfactor，TCSF〕。第七页，共四十九页。进一步研究说明TCSF不仅能刺激MMP-1的产生，还能刺激MMP-2、MMP-3、MMP-9和MMP-11等的产生，因此将其重命名为细胞外基质金属酶诱导因子〔extracellularmatrixmetalloproteinaseinducer，EMMPRIN)。第六届人类白细胞分化抗原协作组会议将EMMPRIN命名为CD147。第八页，共四十九页。CD147的结构CD147属单次跨膜糖蛋白，胞外段中的4个半胱氨酸残基形成2个二硫键，构成2个典型的半球形Ig结构域。第九页，共四十九页。细胞内的CD147存在低糖基化〔lowglycosylatedCD147，LG〕和高糖基化〔highglycosylatedCD147，HG〕形式，分子量分别是32~44kDa、45~65kDa。只有HG形式能刺激MMP的产生。第十页，共四十九页。CD147的功能CD147是一种广泛表达于细胞外表，在体内分布广泛，参与精子发生、胚胎发育、肿瘤的侵袭和转移、炎症反响、病毒感染等多种生理和病理过程，是一个多功能的分子。第十一页，共四十九页。免疫组化实验证实CD147在多种恶性肿瘤中高表达，包括膀胱癌、皮肤癌、肺癌、乳腺癌、淋巴癌和胰腺癌等。并且肿瘤的恶性程度越高，CD147的表达水平也越高。第十二页，共四十九页。CD147在肿瘤发生开展中的作用1.促进肿瘤的侵袭和转移CD147就是通过刺激成纤维细胞及肿瘤细胞本身产生多种MMP来降解基底膜和细胞外基质，从而促进肿瘤的浸润和转移的。第十三页，共四十九页。2.诱导肿瘤血管生成血管内皮生长因子〔vascularendothelialgrowthfactor，VEGF〕是很多情况下血管生成过程的主要调节因子，包括肿瘤形成过程。CD147可以诱导VEGF的表达。第十四页，共四十九页。3.促进肿瘤细胞多药耐药在多种多药耐药的肿瘤细胞中都观察到CD147的高表达。CD147可激活PI3K/AKT细胞存活信号通路。在大多数恶性肿瘤细胞中此通路均被激活。第十五页，共四十九页。胃癌中CD147的表达日本Toyama大学的ZhengHC等研究说明：在正常胃黏膜开展为增生性或化生性胃黏膜，最后开展为胃癌的过程中，CD147的表达量是逐渐增加的，并且CD147的表达与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移以及MMP-2、MMP-9和VEGF的表达呈正相关。第十六页，共四十九页。胃癌组织中CD147的表达CD147在胃癌组织中高表达第十七页，共四十九页。二.研究目标第十八页，共四十九页。本实验旨在运用RNA干扰技术抑制胃癌细胞株SGC7901中CD147基因的表达，研究该基因沉默后对肿瘤细胞生长、侵袭能力及化疗药物敏感性的影响，探讨CD147在胃癌中的作用。第十九页，共四十九页。三、研究方法及结果第二十页，共四十九页。CD147shRNA真核表达载体的构建与鉴定↓转染SGC7901细胞，筛选稳定表达干扰载体的SGC7901细胞株↓MTT法检测SGC7901细胞增殖水平的变化↓明胶酶谱法检测SGC7901细胞MMP-2、MMP-9分泌的变化↓SGC7901细胞体外侵袭力测定↓MTT检测SGC7901细胞顺铂敏感性的变化技术路线技术路线第二十一页，共四十九页。胃癌细胞株SGC7901源自一位56岁女性胃腺癌患者的淋巴结转移瘤。研究说明其侵袭...