动物细胞工程动物细胞工程动物细胞工程的技术手段动物细胞工程的技术手段动物细胞工程技术的基础动物细胞工程技术的基础动物细胞培养动物细胞培养常用技术手段常用技术手段动物细胞工程动物细胞工程动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合生产单克隆抗体生产单克隆抗体动物细胞核移植动物细胞核移植一、动物细胞培养过程阅读“动物细胞培养过程”并思考:1、动物细胞培养的概念是什么?该技术实施的原理是什么?特点是什么?2、为什么要对取出的动物组织进行处理,使细胞分散?3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细胞间的物质主要是什么?用胃蛋白酶可以吗?4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?6、简述动物细胞培养的操作过程从动物机体中取出相关组织,将它们分散成从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。生长和增殖。一、动物细胞培养一、动物细胞培养11、、动物细胞培养的概念动物细胞培养的概念2.2.动物细胞培养的原理:动物细胞培养的原理:细胞增殖细胞增殖下图是动物细胞培养的基本过程示意下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答:图。请据此回答:11)容器)容器AA中放置的是动物器官或组中放置的是动物器官或组织。它一般取自织。它一般取自____________________________________________。。((22)容器)容器AA中的动物器官或组织中的动物器官或组织首先要进行的处理是首先要进行的处理是,,然后用然后用酶处理,这酶处理,这是为了使细胞分散开来,这样做的是为了使细胞分散开来,这样做的目的是目的是。。动物胚胎或幼龄动物动物胚胎或幼龄动物剪碎剪碎胰蛋白胰蛋白防止细胞间接触抑制现象,防止细胞间接触抑制现象,使使细胞与培养液充分接触,便于细胞与培养液充分接触,便于培养培养(3)培养首先在B瓶中进行,瓶中的培养基特有成分有__________。在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这是培养到第代,到这时的培养称为__。(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中,用处理,然后配置成,再分装。动物血清动物血清10原代培养原代培养胰蛋白酶胰蛋白酶细胞悬液细胞悬液定义定义::人们通常人们通常将动物组织将动物组织消化消化后后的的初次培养初次培养称称为原代培养。为原代培养。胰蛋白酶处理胰蛋白酶处理取出组织取出组织胚胎或幼龄动物器官组织胚胎或幼龄动物器官组织剪碎剪碎单个细胞单个细胞细胞悬液细胞悬液转入培养瓶内培养转入培养瓶内培养((贴壁生长贴壁生长长成单层细长成单层细胞。有胞。有接触抑制接触抑制现象)现象)。。①①原代培养原代培养过程过程图示图示原代原代培养培养细胞悬液细胞悬液CO2培培养箱养箱细胞贴壁过程细胞贴壁过程■■细胞贴壁:细胞贴壁:在培养瓶悬液中分散的细胞很快就在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。■■培养瓶或培养皿壁要求:培养瓶或培养皿壁要求:表面光滑、无毒、易于贴表面光滑、无毒、易于贴附。附。■■当贴壁细胞分裂当贴壁细胞分裂生长到表面相互接生长到表面相互接触时触时,,细胞就会停细胞就会停止分裂增殖,这种止分裂增殖,这种现象称为细胞的接现象称为细胞的接触抑制。触抑制。接触抑制接触抑制原代培养:原代培养:传代培养:传代培养:原代培养与传代培养的区别分装之前,分装之前,1010代以前代以前分装后继续培养,分装后继续培养,1010代以后代以后3.动物细胞培养条件:1、无菌、无毒的环境(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)2、营养(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。)3、温度和PH36.5+(-)0.5度,7.2-7.44、气体环境:O2和CO2(95%空气和5%CO2)保证细胞顺利的生长增殖动物细胞培养液的主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。与植物培养基相比其特点是:(1)液体培养基(2)含有动物血清动物体细胞大都生活在液体的环境22、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织、为什...