专题一:专题2细胞工程细胞工程动物体细胞核移植技术和克隆动物2
1动物细胞培养和核移植技术常用的技术手段动物细胞培养(基础)动物细胞融合单克隆抗体制备动物体细胞核移植技术和克隆动物复习问题1、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞
问题2:为什么用胰蛋白酶处理
分散成单个细胞便于物质交换,使营养物质吸收及代谢废物排出更容易,利于细胞生长和繁殖问题3:为什么用胰蛋白酶处理而不用胃蛋白酶
动物细胞培养的最适PH值为7
4,胰蛋白酶作用的适宜PH为7
4,胃蛋白酶适宜PH为2
胃蛋白酶在PH为7
4的动物细胞培养中无活性
细胞贴壁:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁
细胞的接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制
复习问题4:几个概念
•原代培养:•从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞
培养的第1代细胞与繁殖10代以内的细胞称为原代细胞培养
•传代培养:•将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养
复习细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株
细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系
细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养
复习动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液原代培养胰蛋白酶剪碎细胞株细胞系复习问题5:过程
问题6、动物细胞培养液的主要成分是什么
较植物组培培养基有何独特之处
问题7、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体
主要成分:(葡萄