基因工程菌发酵操作流程1.检查发酵车间是否达到发酵要求(所以设备处于待用状态)。2.通知蒸汽车间按时送符合要求蒸汽。3.种子罐基础培养基的领料及定容配制。4.种子罐的PH、DO电极的校正安装和补料口堵头更换。5.种子罐进料,调PH。6.种子罐基础培养基在位灭菌,同时灭移种管道上段。7.种子罐冷却后可连接酸、碱、消泡剂补料瓶。8.种子罐培养基温度、PH(需进一步校准)、罐压、消泡达到发酵条件。通知菌种室准备菌种转接。9.无菌操作将种子罐所需MgSO4、Amp转入菌种转换罐。10.种子罐扩增培养发酵阶段需平稳控制罐压、PH、DO、温度、消泡。11.大罐基础培养基领料及配制。12.大罐PH、DO电极校正安装及补料口堵头的更换。13.大罐进料、定容、调PH;碱罐碱液的配制。14.大罐基础培养基在位灭菌,同时对移种管道、进料管道、补料管道、碱罐及碱管道上段的灭菌。15.大罐基础培养基温度降至发酵温度后再次校准PH、DO。连接补料瓶调节至发酵条件。16.无菌操作将大罐所需MgSO4、Amp转入菌种转换罐并转入种子罐。17.利用压力差将种子罐里的种子液移接到大罐。18.补碱时,将管道上阀门打开。程序设为自动,控制流量。19.补料罐补料培养基的领料定容配制。20.补料罐补料培养基在位灭菌,同时对管道上段灭菌。21.补料时,将管道上阀门打开。程序设为自动,设置流量。22.诱导剂领料,在配料罐中加水配制定容。23.将诱导剂打入种子罐,灭菌后保持罐压。24.利用压力差将种子罐里的诱导剂移接到大罐。25.一段时间后,大罐的PH、DO呈上升形态即为发酵结束,可放罐离心。芽孢杆菌发酵操作流程1.检查发酵车间是否达到发酵要求(所以设备处于待用状态)。2.通知蒸汽车间按时送符合要求蒸汽。3.种子罐基础培养基的领料及定容配制。4.种子罐的PH、DO电极的校正安装和补料口堵头更换。5.种子罐进料,调PH。6.种子罐基础培养基在位灭菌,同时灭移种管道上段。7.种子罐冷却后可连接酸、碱、消泡剂补料瓶。8.种子罐培养基温度、PH(需进一步校准)、罐压、消泡达到发酵条件。通知菌种室准备菌种转接。9.无菌操作将种子罐所需MgSO4、Amp转入菌种转换罐。10.种子罐扩增培养发酵阶段需平稳控制罐压、PH、DO、温度、消泡。11.大罐基础培养基领料及配制。12.大罐PH、DO电极校正安装及补料口堵头的更换。13.大罐进料、定容、调PH;碱罐碱液的配制。14.大罐基础培养基在位灭菌,同时对移种管道、进料管道、碱罐及碱管道上段的灭菌。15.大罐基础培养基温度降至发酵温度后再次校准PH、DO。连接酸、消泡剂补料瓶调节至发酵条件。16.无菌操作将大罐所需MgSO4、Amp转入菌种转换罐并转入种子罐。17.利用压力差将种子罐里的种子液移接到大罐。18.补碱时,将管道上阀门打开。程序设为自动,控制流量。19.发酵一定时间后,程序中PH设为手动,停止对PH、DO控制20.一段时间后,大罐里孢子大量生长后即为发酵结束,可放罐离心.种子罐灭菌二.发酵罐灭菌1.首先排夹套水,关闭所有阀门。然后先后打开夹套排污阀、夹套进蒸汽阀。夹套开始进蒸汽对罐体进行预热。2.微开取样排蒸汽阀、取样进蒸汽阀,对取样管路进行灭菌。灭菌时间一般分钟。取样管路灭菌结束后,先后关闭排蒸汽阀、进蒸汽阀3.全开过滤器后端隔离阀,微开过滤器蒸汽排放阀、过滤器进蒸汽阀,对过滤器及管路进行灭菌,每隔一段时间需打开过滤器下端排污阀排放过滤器壳内冷凝水,通过调节进出蒸汽流量的大小将过滤器壳内压力维持在左右。灭菌时间一般分钟。过滤器灭菌结束后,同时关闭过滤器后端隔离阀、过滤器进蒸汽阀,关闭阀门时过滤器壳内压力不允许跌到,然后开启过滤器前端隔离阀通入空气,过滤器壳内压力在左右后,关闭过滤器前端隔离阀,将过滤器段保压。需注意,因过滤器壳与管路降温时,内部压力也会损失,因此在压力损失后通入空气以便维持其保压压力。4.在发酵罐罐温度上升期间,要打开启尾气调节阀排放罐内冷空气然后关闭。当罐内温度升到°C时,打开放料进蒸汽阀和放料阀,使蒸汽从放料阀进入罐内,并打开进气路进蒸汽阀,先将进气路进蒸汽阀到过滤器蒸汽排放阀间那段管路灭透后,关闭过滤器蒸汽排放阀,打开进气隔膜阀,使蒸汽从空气管路进入罐内。5-当温...