10:54:0510:54:05主讲:于素华Unit3紫外-可见分光光度法10:54:0510:54:05基本内容基本内容123测量条件的选择紫外-可见分光光度计基本原理分析方法应用与示例10:54:0510:54:051.1物质对光的选择性吸收1.2光的吸收基本定律——朗伯-比耳定律1基本原理10:54:0510:54:05InstrumentalAnalysis41.1物质对光的选择性吸收单色光、复合光、光的互补单色光、复合光、光的互补单色光、复合光、光的互补单色光、复合光、光的互补单色光单色光单色光单色光复合光复合光复合光复合光光的互补光的互补光的互补光的互补单一波长的光单一波长的光由不同波长的光组合而成的光由不同波长的光组合而成的光若两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混若两种不同颜色的单色光按一定的强度比例混合得到白光,那么就称这两种单色光为互补色合得到白光,那么就称这两种单色光为互补色光,这种现象称为光的互补。光,这种现象称为光的互补。10:54:0510:54:05InstrumentalAnalysis5物质呈现的颜色是该物质所吸收光的互补色光的颜色。物质呈现的颜色是该物质所吸收光的互补色光的颜色。1.1.1溶液颜色的产生10:54:0510:54:05吸收光溶液颜色(互补色)/nm颜色400-450紫黄绿450-480蓝黄480-490绿蓝橙490-500蓝绿红500-550绿红紫560-580黄绿紫580-600黄蓝600-650橙绿蓝650-780红蓝绿物质颜色和吸收光颜色的关系10:54:0510:54:051.1.2光吸收的本质----物质对光的选择性吸收M+hυ→M*基态激发态E1(△E)E2M+热M+荧光或磷光sp*s*RKE,BnpE紫外-可见吸收光谱:分子价电子能级跃迁。10:54:0510:54:051.1.3物质对光的吸收曲线常用术语常用术语吸收曲线(吸收光谱):测量每一波长下有色溶液对光的吸收程度(即吸光度A),然后以波长为横坐标,吸光度为纵坐标作图,得到的曲线。吸收峰、吸收谷最大/小吸收波长(λmax/λmin)吸收曲线上的吸收峰/谷对应波长肩峰(λsh)吸收曲线上一个吸收峰旁边产生的一个曲折末端吸收吸收曲线上短波端只呈现强吸收而不成峰形的部分蓝移(紫移、短移)、红移(长移)浓/淡色效应吸收强度增加/减弱的效应10:54:0610:54:069吸收光谱示意图肩峰(shoulderpeak)吸收峰(peak)谷(valley)末端吸收10:54:0610:54:061.1.3物质对光的吸收曲线•紫外-可见吸收光谱曲线:A-λ曲线。不同波长固定浓度固定厚度有色溶液10:54:0610:54:062011-02InstrumentalAnalysis1110:54:0610:54:062011-0212C10:54:0610:54:0610:54:0610:54:0610:54:0610:54:062011-02InstrumentalAnalysis1510:54:0610:54:062011-02InstrumentalAnalysis16同一物质对不同波长光的A不同--λmax处选择性吸收。不同C同一种物质,吸收曲线形状相似,λmax不变;不同C不同物质,吸收曲线形状和λmax不同。吸收曲线提供物质结构信息,并作为定性分析的依据之一。不同C同一种物质,在λmax处差异最大--定量分析的依据。在λmax处A随C的变幅最大--测定最灵敏。吸收曲线的讨论:10:54:0610:54:062011-02InstrumentalAnalysis171.2光的吸收基本定律——朗伯-比耳定律1729年,布格(Bouguer):A∝b1760年,朗伯(Lambert):A∝b1852年,比耳(Beer):A∝c二者结合称为二者结合称为朗伯朗伯--比尔比尔((LambertLambert--BeerBeer)定律。)定律。——吸光光度法的理论基础和定量测定依据。10:54:0610:54:062011-02InstrumentalAnalysis18朗伯朗伯--比尔定律:比尔定律:当一束平行单色光通过当一束平行单色光通过单一均匀单一均匀的、非散射的吸光物质溶液时,其吸光度与溶液浓度的、非散射的吸光物质溶液时,其吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成和液层厚度的乘积成正比正比。。入射光I0透射光IbCbcIIA0lgεε:吸光系数,L/(mol·cm)不随不随cc和和bb的改变而改变;的改变而改变;定性鉴定参数;定性鉴定参数;λmax处处εεmaxmax最大最大;;εεmaxmax越大,吸光能力越强,灵敏度越高。越大,吸光能力越强,灵敏度越高。10:54:0710:54:07吸光度A:透光度T:入射光透过溶液的程度T=I/I0A、T关系:A=-lgT透光度(透光率T)10:54:0710:54:07InstrumentalAnalysis20光吸收定律的适用范围•单色光单色光•稀溶液稀溶液•透明溶液透...