糖化血红蛋白检测标准化及方法学进展哈尔滨医科大学附属第四医院检验科梁红艳中国糖尿病现状中国糖尿病现状1.14亿糖尿病患者，4.93亿糖尿病前期人群(2010年调查结果，根据2010年ADA糖尿病诊断标准)背景：•CDC和上海内分泌研究所慢性流行病调查•覆盖全国31省，98658成年人群•在成年人群中，糖尿病患者11.6%，前期人群50.1%IDF=InternationalDiabetesFederation重要变革：2010年ADA糖尿病诊治指南增加糖化血红蛋白(HbA1c)≥6.5%作为糖尿病的诊断标准source：www.care.diabetesjournals.orgHbA1c标准化的目的•电荷差异–离子层析法：HPLC–电泳法•结构特异性–免疫法–亲和层析法标准化不同方法测定结果具有可比性HbA1C参考系统的种类•1、国际临床化学协会(IFCC)•2、美国国家糖尿病标准化计划(NGSP)•3、日本的糖尿病协会/临床检验协会体系(JDS/JSCC)•4、瑞典的Mono-SHbA1c检测标准化进程确认IFCC参考系统是检测“金标准”1985年DCCT（糖尿病控制和综合征研究试验）目的：评估了严格控制血糖对预防糖尿病人的慢性并发症的重要意义。1993年NGSP(国家糖化血红蛋白标准化计划）目的：对HbA1c检测结果标准化，以使临床实验室的检测结果和DCCT的结果有可比性。1995年IFCC（国际临床化学学会）HbA1c标准化工作组，2002年完成参考系统建立。目的：确定HbA1c检测的国际标准化2010年ADA/EASD/IDF/IFCC国际共识确认IFCC参考系统为全球HbA1c标准化唯一系统各国糖化血红蛋白标准化计划同一个样本，结果差异大瑞典美国NGSPIFCC级别国家—美国糖化血红蛋白标准化计划国际糖化血红蛋白标准化计划目的使临床实验室的HbA1c检测结果与DCCT的结果具有可比性建立全球HbA1c参考系统，使各种常规检测方法标准化原理HbA1c由色谱图上的色谱峰决定，非特异性HbA1c由其分子结构进行定义并纯化，通过参考方法（HPLC-ESI/MS,HPLC-CE)特异性检测标准品/标准化基于DCCT参考值得出的标准品根据纯化的HbA1c和HbA0得出参考物质，制成标准品报告单位%HbA1cmmol/molHbA1cNGSP和IFCC的区别HbA1c国际标准化IFCC建立最高溯源标准HbA1cNGSP缺乏统一公认的标准物质和参考方法。制备高度纯化的一级标准物质明确定义HbA1c建立特异性检测HbA1c的方法IFCC建立目标ADA/EASD/IDF/IFCC国际共识(2010年)确认IFCC参考系统是标准化唯一参考系统Source:Consensusstatement,DIABETESCARE,VOLUME30,NUMBER9,SEPTEMBER2007,2399-24001.A1Ctestresultsshouldbestandardizedworldwide,includingthereferencesystemandresultsreporting.2.ThenewIFCCreferencesystemforA1Crepresentstheonlyvalidanchortoimplementstandardizationofthemeasurement.3.A1CresultsaretobereportedworldwideinIFCCunits(mmol/mol)andderivedNGSPunits(%),usingtheIFCC-NGSPmasterequation.Dualreporting4.Iftheongoing“averageplasmaglucosestudy”fulfillsitsapriori–specifiedcriteria,anA1C-derivedaverageglucose(ADAG)valuecalculatedfromtheA1CresultwillalsobereportedasaninterpretationoftheA1Cresults.IFCC参考系统是HbA1c标准化唯一的检测标准糖化血红蛋白实验室检测指南(2013年8月)《中国糖尿病杂志》•IFCC参考系统是HbA1c测定标准化唯一有效的参考系统。•应用国际标准物质。•现行的NGSP可溯源到IFCC参考系统IFCC参考系统的建立科学家（欧洲-美国-日本-澳大利亚）IFCC参考方法欧盟一级参考实验室IFCC参考方法流程（特异性检测）2.用AgilentHPLC进行酶切肽链粗品分离HPLC*3.用质谱定量分离糖化和非糖化肽链massspectrometer*1.血红蛋白酶切非糖化(HbA0)N-端六肽糖化(HbA1c)N-端六肽ProcesspatentedbyRoche*UsedinourPenzbergfacilities卫生部临检中心HbA1c室间数据（2013年）罗氏检测平台的室间CV为2.5％和3.17％Source:ngsppt201311%11%54%24%31%67%2%免疫法离子交换色谱电泳法亲和层析色谱1995年（889家）2013年（3240家）CAPHbA1c室间比对用户方法学统计（2013.10）免疫法操作便捷、通量大、成本低，已成为国际的主流方法全球：参加CAPHbA1c室间比对用户中免疫法是主流3240家参与用户中免疫法占67%（2013年PT）423家413家176家...
