PCRPCR技术在乙肝方面的应用技术在乙肝方面的应用TheapplicationofPCRtechniqueinHBVTheapplicationofPCRtechniqueinHBV涿州市医院检验科涿州市医院检验科刘鹏年刘鹏年HepatitisBVirusHepatitisBVirus乙型肝炎的病原体乙型肝炎的病原体在全世界广泛流行,估计全球半数以上人在全世界广泛流行,估计全球半数以上人口已被口已被HBVHBV感染过。感染过。中国:乙肝高发区,人群中国:乙肝高发区,人群HBsAgHBsAg的检出率的检出率达达9.8%9.8%乙型肝炎病毒感染的现状乙型肝炎病毒感染的现状全球约有全球约有3.53.5亿人感染乙型肝炎病毒,中国有亿人感染乙型肝炎病毒,中国有1.1.22亿人感染,其中每年约有亿人感染,其中每年约有1-2%1-2%会出现肝硬化会出现肝硬化或肝癌而死亡。乙型肝炎是一种严重危害人类健或肝癌而死亡。乙型肝炎是一种严重危害人类健康的传染病,它是由乙肝病毒康的传染病,它是由乙肝病毒(HBV)(HBV)感染引起感染引起的。全世界乙肝携带者达的。全世界乙肝携带者达55亿之多,我国是乙肝亿之多,我国是乙肝携带者高于人群的携带者高于人群的1010%。急性乙肝中有%。急性乙肝中有20%20%会会转为慢性,进而可能发展为肝硬化和肝癌,因此,转为慢性,进而可能发展为肝硬化和肝癌,因此,准确、迅速诊断对乙肝的治疗和预后显得极为重准确、迅速诊断对乙肝的治疗和预后显得极为重要。要。乙型肝炎病毒属嗜肝乙型肝炎病毒属嗜肝DNADNA病毒科(病毒科(hepahepadnaviridaednaviridae),基因组长度),基因组长度3.2kb3.2kb目前感染人类最小的目前感染人类最小的DNADNA病毒病毒部分双链环状部分双链环状DNADNA。。HBV基因及编码蛋白HepatitisBVirusHepatitisBVirus乙肝的实验室诊断乙肝的实验室诊断(一)生化学检查(一)生化学检查(二)(二)HBVHBV血清学检查血清学检查(三)(三)HBVDNAHBVDNA、基因型和变异检查、基因型和变异检查生化学检查生化学检查ALTALT和和ASTAST血清胆红素血清胆红素凝血酶原时间(凝血酶原时间(PTPT)及)及PTAPTA胆碱酯酶胆碱酯酶血清白蛋白血清白蛋白甲胎蛋白(甲胎蛋白(AFPAFP))生化检测的局限性生化检测的局限性敏感度有限敏感度有限代表肝细胞损害,水平高低不能代表肝储代表肝细胞损害,水平高低不能代表肝储备能力备能力关于“胆酶分离”现象关于“胆酶分离”现象HBVHBV血清学检查血清学检查项目:项目:HBsAgHBsAg、抗、抗-HBs-HBs、、HBeAgHBeAg、、抗抗-HBe-HBe、抗、抗-HBc-HBc以及抗以及抗-HBcIgM-HBcIgM方法方法ELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassayELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassay,,最常用,定性最常用,定性))发光免疫分析发光免疫分析((定量定量))HBsAgHBsAg––感染的标志感染的标志Anti-HBsAnti-HBs––既往感染既往感染//接种疫苗接种疫苗Anti-HBcIgMAnti-HBcIgM––急性感染标志急性感染标志Anti-HBcIgGAnti-HBcIgG––既往或慢性感染既往或慢性感染HBeAgHBeAg––急性病毒复制,有传染性急性病毒复制,有传染性Anti-HBeAnti-HBe––病毒不再复制病毒不再复制HBV-DNAHBV-DNA––急性病毒复制,比急性病毒复制,比HBeAgHBeAg更准更准确;主要用于监测治疗反应确;主要用于监测治疗反应血清学检测的临床意义血清学检测的临床意义HBsAgHBsAg抗抗-HBsHBeAg-HBsHBeAg抗抗-HBe-HBe抗抗-HBc-HBc临床意义临床意义急性或慢性感染(大三阳)+-+-++++乙肝后期或慢性感染(小三阳)--++---潜伏期或急性乙肝早期--+++痊愈或恢复期,有免疫力-----+++--痊愈,有免疫力疫苗接种或曾经感染过,有免疫力血清学检测的局限性血清学检测的局限性HBVHBV具有“检测窗口期”具有“检测窗口期”假阴性结果假阴性结果无法检测突变株及抗体无法检测突变株及抗体SymptomsHBeAganti-HBeIgGanti-HBcIgManti-HBcanti-HBsHBsAg0481216202428323652100AcuteHBVInfectionwithRecoveryTypicalSerologicCourseWeeksafterExposureTitreIgManti-HBcIgGanti-HBcHBsAgAcute(6months)HBeAgChronic(Years)anti-HBe0481216202428323652YearsWeeksafterExposureTitreProgressiontoChronicHBVInfectionTyp...