细菌耐药机制(huishi)VIP免费

细菌耐药机制研究进展浙江大学医学院附属第一医院俞云松AntibioticinteractionswithgramnegativeorganismsAntibioticinteractionswithgramnegativeorganismspenicillinbindingproteinspenicillinbindingproteinsOmpFOmpFOmpCOmpCCephalosporinsCephalosporinsslowerdiffusionduetoslowerdiffusionduetobulkandionicchargesbulkandionicchargesImipenemImipenemRapiddiffusionduetosmallsizeRapiddiffusionduetosmallsizeandzwitterionicandzwitterionic+/-charge)+/-charge)PBP3PBP3PBP2PBP2PBP1aPBP1aPB1bPB1bBetaLactamases(hydrolyzingenzymes)CBD/RR一、外膜孔蛋白减少或丢失•细胞内抗生素浓度降低–膜孔蛋白(OprD):细胞外膜上的某些特殊蛋白是一种非特异性的、跨越细胞膜的水溶性物质扩散通道。膜孔蛋白革兰阴性细菌细胞膜某些细菌本身存在的膜孔蛋白较少或蛋白通道较小，使一些抗菌药物不能进入菌体内部，称为“内在性耐药”或“固有性耐药”（intrinsicallyresistant），即这种耐药并非是由于任何染色体的突变或是耐药质粒的获得所致。如铜绿假单胞菌的细胞外膜上没有大多数革兰阴性细菌所具有的典型的高渗透性孔蛋白，它的孔蛋白通道对小分子物质的渗透速度仅为典型孔蛋白通道的1%。“先天不足”一些具有高渗透性外膜且对抗菌药物敏感的细菌可以通过降低外膜的渗透性而发展成为耐药菌，即原有的孔蛋白通道由于细菌发生突变而使该孔蛋白通道关闭或消失，则细菌就会对该抗菌药物产生很高的耐药性。亚胺培南是一种非典型的β-内酰胺类抗菌药物，主要是通过一个特殊的孔蛋白通道OprD2的扩散进入细菌的，一旦这一孔蛋白通道消失，则产生耐药性。“后天获得”产气肠杆菌从亚胺培能敏感株变为耐药株亚胺培南敏感及耐药的产气肠杆菌PFGE图C1C2:亚胺培南敏感C3C4:亚胺培南耐药亚胺培南敏感及耐药的产气肠杆菌SDS图C1C2:亚胺培南敏感C3C4:亚胺培南耐药PCR扩增Omp36全长及序列分析IS90398%（约1000bp)插入序列引起OprD2缺失（铜绿）ISPa1328约2000bpOprD2细菌产生一种或多种水解酶或钝化酶来水解或修饰进入细胞内的抗菌药物，使之到达靶位之前失去活性细菌产生的灭活酶主要有：β-内酰胺酶氨基糖苷类钝化酶氯霉素乙酰转移酶MLS钝化酶二、产生灭活酶超广谱-内酰胺酶（ESBLs）高产AmpC酶碳青霉烯酶最主要的耐药因素对-内酰胺抗生素造成威胁-内酰胺酶临床上最重要的-内酰胺酶是质粒介导的能够水解头孢他啶、头孢噻肟等亚氨基β-内酰胺类及氨曲南等单环酰胺类抗生素，并可被克拉维酸等β-内酰胺酶抑制剂所抑制的一类β-内酰胺酶。ESBLs在分子生物学分类中属于A类酶，在Bush分类中属于2be类酶。超广谱-内酰胺酶（extended-spectrum-lactamases，ESBLs）ESBLs的分类根据基因同源性不同分为：–TEM型80–SHV型46–CTX-M型37–OXA型18–其它型20http://www.lahey.org/studies/webt.htm.CTX-M-1组CTX-M-2组CTX-M-8组CTX-M-9组北京浙江新疆郑州基因型ECKPECKPECKPECKP合计CTX-M-14237763295372209CTX-M-3161661385257CTX-M-245598229CTX-M-22268CTX-M-933CTX-M-281113CTX-M-1311CTX-M-2711CTX-M-2911SHV-12311510SHV-51214SHV-222CTX-M-14+CTX-M-224134416CTX-M-14+CTX-M-322CTX-M-14+SHV-12134CTX-M-3+SHV-1211CTX-M-9+SHV-1211CTX-M-22+SHV-1211CTX-M-24+SHV-1211CTX-M-14+CTX-M-22+SHV-1211CTX-M-14+CTX-M-22+SHV-1211未检出ESBLs基因型7814689144合计5543109614226586400中国400株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型分布32家医院1994-2003年大肠杆菌及肺炎克雷伯菌产ESBLs百分率0102030405060701994199519961998199920002001200220032004年份百分比大肠杆菌肺炎克雷伯菌头孢菌素酶大部分肠杆菌科细菌如肠杆菌属菌种、弗劳地枸橼酸杆菌、摩根摩根菌、普鲁菲登菌属菌种粘质沙雷菌等都能产生染色体介导的AmpC酶。阴沟肠杆菌ACT-1,DHA-1,CMY(Peking)DHA-1,CIT,ACT-1(Shanghai)DHA-1(Zhejiang)DHA-1,ACT-1(GuangZhou)DHA-1isThePredominantTypeinChinaMapofChina克隆片段PCR产物1100bp共6432bpORF1ORF2ORF3ORF4ORF5ORF6IS26orf-1DHA-1ampRqacE1sul1⊿5232bp指所有...